| 查看: 2695 | 回复: 8 | |||
| 【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 cindyyue19 的 1 个金币 | |||
cindyyue19金虫 (小有名气)
|
[交流]
大肠杆菌蛋白表达时用何种方法去除N端甲硫氨酸?
|
||
| 最近想要表达蛋白，想要去掉N端的甲硫氨酸，请问哪位高手能指导一二? |
回复此楼» 猜你喜欢
毕业后当辅导员了，天天各种学生超烦
已经有5人回复
-
职称评审没过，求安慰
已经有50人回复
-
26申博自荐
已经有3人回复
-
A期刊撤稿
已经有4人回复
-
垃圾破二本职称评审标准
已经有17人回复
-
投稿Elsevier的Neoplasia杂志，到最后选publishing options时页面空白，不能完成投稿
已经有22人回复
-
EST投稿状态问题
已经有7人回复
mritang
新虫 (知名作家)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 2736.7
- 散金: 7539
- 红花: 21
- 帖子: 6160
- 在线: 471.1小时
- 虫号: 2455389
- 注册: 2013-05-09
- 性别: GG
- 专业: 中兽医学
2楼2020-09-22 07:08:12
pennchem
专家顾问 (正式写手)
-
专家经验: +21 - BioEPI: 5
- 应助: 297 (大学生)
- 金币: 10325.7
- 散金: 65
- 红花: 28
- 帖子: 595
- 在线: 1096.4小时
- 虫号: 2139205
- 注册: 2012-11-21
- 专业: 生物大分子结构与功能
- 管辖: 生物科学
3楼2020-09-22 08:04:34
zsygxh
金虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 1110.3
- 散金: 11
- 红花: 2
- 帖子: 105
- 在线: 56.5小时
- 虫号: 2821684
- 注册: 2013-11-23
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
4楼2020-09-22 13:24:19
cindyyue19
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2305.8
- 散金: 9
- 红花: 1
- 帖子: 154
- 在线: 56.9小时
- 虫号: 976505
- 注册: 2010-03-20
- 性别: MM
- 专业: 微生物遗传育种学
5楼2020-09-22 17:11:57
zsygxh
金虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 1110.3
- 散金: 11
- 红花: 2
- 帖子: 105
- 在线: 56.5小时
- 虫号: 2821684
- 注册: 2013-11-23
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
cindyyue19: 金币+1 2020-10-07 09:56:36
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
cindyyue19: 金币+1 2020-10-07 09:56:36
|
我前面的表述可能有点问题。我本意是想说，如果你是在实验室里，需要几十到几百mg蛋白用于实验研究，那么直接重新构建质粒，在N端连上一个能完全去除的标签就行了，这样简单、方便、高效。如果你是在药企或其它单位，需要大量生产这个蛋白的话，那么需要考虑产量的问题。比如，在菌体表达蛋白总量相当的情况下，融合标签越长，目的蛋白占总蛋白比例就越少，所以产量就越少，而如果你的目的蛋白分子量本身就很小，那影响会更明显。再比如，序列发生变化，表达量也会变化，极端（且常见）情况下甚至不表达。所以如果是生产的情况，建议你尝试构建多种不同的标签，根据实际表达来定夺（需要考虑融合蛋白的表达总量，蛋白结构/活性的变化，副产物对后续工艺的影响等等，比较麻烦）。我前面语境好像在说融合标签不适合生产，其实融合在生物制药生产中是很常见的，这其实只是我表述有问题。其它能够彻底、均一地切除fMet并且不对目的蛋白结构造成影响的方法，目前我不太清楚。 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
cindyyue196楼2020-09-25 16:38:59
cindyyue19
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2305.8
- 散金: 9
- 红花: 1
- 帖子: 154
- 在线: 56.9小时
- 虫号: 976505
- 注册: 2010-03-20
- 性别: MM
- 专业: 微生物遗传育种学
7楼2020-10-07 09:56:45
8楼2020-10-08 22:14:02
，谢谢了！ 9楼2021-10-31 11:25:43