应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 重组质粒转化不长菌
81/1返回列表
查看: 6306  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者yimifffffff将赠送您 10 个金币

yimifffffff

新虫 (初入文坛)

[求助] 重组质粒转化不长菌 已有1人参与

我做的重组质粒，把1000bp的基因片段连接到5.3kb的pet26b载体上，转化到Origami2大肠杆菌感受态细胞，用的加了抗生素的LB平板，不长菌是怎么回事呀？做了对照：空载体直接转化，涂到抗生素平板，也是不长菌；但是涂到没加抗生素的平板上长了一堆密密麻麻的小菌落，到底咋回事呀？

@biostar2009 @wizardfan @youlinglyw @飞约疯人院 发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2020-09-06 20:45:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

峨眉小强

铁杆木虫 (著名写手)
是不是抗性弄错了呀

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
2楼2020-09-06 22:36:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cy19880610

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
时间放长一点。一般来说大肠杆菌8到10个小时菌斑就很大了，但是有的基因转化进去后会导致菌落生长缓慢。我当年有个基因构建载体到大肠杆菌感受态后，需要3~5天才能长出正常大小的菌斑，当时一度以为是杂菌，构建了2个月，后来发现就是这么慢，导致开始生长缓慢觉得平板上完全没有生长。
赞一下 回复此楼
善男信女
3楼2020-09-07 08:56:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yimifffffff

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by cy19880610 at 2020-09-07 08:56:03
时间放长一点。一般来说大肠杆菌8到10个小时菌斑就很大了，但是有的基因转化进去后会导致菌落生长缓慢。我当年有个基因构建载体到大肠杆菌感受态后，需要3~5天才能长出正常大小的菌斑，当时一度以为是杂菌，构建了2 ...

现在已经32个小时了，还是一点都没长，我做了好几个板子，都没长，但是没加抗生素的板子都已经长成大菌斑了，太愁人了。。

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
4楼2020-09-07 12:20:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yimifffffff

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 峨眉小强 at 2020-09-06 22:36:31
是不是抗性弄错了呀

用的pet26b载体，抗生素是卡那，没错呀，我加了双抗，pet26b的卡那（终浓度50ug/ml）和Origami2（DE3）的四环素（终浓度50ug/ml），还做了空载体的对照（也加双抗），都不长菌，32小时了，不加抗生素的板子都长了大菌斑了～

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
5楼2020-09-07 12:24:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shen134

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
6楼2020-09-13 22:44:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

藤椒味的

新虫 (初入文坛)
你要不就用卡那单抗试试？还是已经试过了也没长....
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2020-09-16 14:47:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ppppzj5201

铁虫 (小有名气)
化转后重旋的菌液分开涂两个单抗板，筛下哪个板有问题？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2021-04-19 22:13:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yimifffffff 的主题更新
81/1返回列表
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 9/450 2026-08-23 03:31 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 9/450 2026-08-23 03:04 by OEbVnUOu01ol
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 4/200 2026-08-23 01:04 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 3/150 2026-08-22 22:03 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 什么时候开奖？ +7 CrisMessi 2026-08-18 8/400 2026-08-22 18:29 by 淀粉搬运工
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +10 kulium 2026-08-21 13/650 2026-08-21 21:58 by alongwaytogo
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +11 大萍1987 2026-08-20 13/650 2026-08-21 14:48 by 20120902066
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭