应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 重组质粒转化不长菌
51/1返回列表
查看: 5926  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者yimifffffff将赠送您 10 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

yimifffffff

新虫 (初入文坛)

[求助] 重组质粒转化不长菌 已有1人参与

我做的重组质粒，把1000bp的基因片段连接到5.3kb的pet26b载体上，转化到Origami2大肠杆菌感受态细胞，用的加了抗生素的LB平板，不长菌是怎么回事呀？做了对照：空载体直接转化，涂到抗生素平板，也是不长菌；但是涂到没加抗生素的平板上长了一堆密密麻麻的小菌落，到底咋回事呀？

@biostar2009 @wizardfan @youlinglyw @飞约疯人院 发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2020-09-06 20:45:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yimifffffff

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by cy19880610 at 2020-09-07 08:56:03
时间放长一点。一般来说大肠杆菌8到10个小时菌斑就很大了，但是有的基因转化进去后会导致菌落生长缓慢。我当年有个基因构建载体到大肠杆菌感受态后，需要3~5天才能长出正常大小的菌斑，当时一度以为是杂菌，构建了2 ...

现在已经32个小时了，还是一点都没长，我做了好几个板子，都没长，但是没加抗生素的板子都已经长成大菌斑了，太愁人了。。

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
4楼2020-09-07 12:20:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

峨眉小强

铁杆木虫 (著名写手)
是不是抗性弄错了呀

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
2楼2020-09-06 22:36:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cy19880610

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
时间放长一点。一般来说大肠杆菌8到10个小时菌斑就很大了，但是有的基因转化进去后会导致菌落生长缓慢。我当年有个基因构建载体到大肠杆菌感受态后，需要3~5天才能长出正常大小的菌斑，当时一度以为是杂菌，构建了2个月，后来发现就是这么慢，导致开始生长缓慢觉得平板上完全没有生长。
赞一下 回复此楼
善男信女
3楼2020-09-07 08:56:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yimifffffff

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 峨眉小强 at 2020-09-06 22:36:31
是不是抗性弄错了呀

用的pet26b载体，抗生素是卡那，没错呀，我加了双抗，pet26b的卡那（终浓度50ug/ml）和Origami2（DE3）的四环素（终浓度50ug/ml），还做了空载体的对照（也加双抗），都不长菌，32小时了，不加抗生素的板子都长了大菌斑了～

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
5楼2020-09-07 12:24:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学 学硕 理工科均可 不区分研究方向 总分279求调剂 +3 1一11 2026-03-03 3/150 2026-03-03 18:03 by houyaoxu
[考研] 266材料化工求调剂 +3 哇塞王帅 2026-03-03 3/150 2026-03-03 17:58 by houyaoxu
[基金申请] 没有青基直接申请面上，感觉自己疯了 +5 kevin63t 2026-03-02 6/300 2026-03-03 17:15 by taoyijie
[考研] 环境工程学硕288求助调剂 +5 多吃亿口芝士 2026-03-02 5/250 2026-03-03 14:38 by wang_dand
[考研] 材料学硕318求调剂 +11 February_Feb 2026-03-01 11/550 2026-03-03 14:24 by NUAAZXWS
[考研] 欢迎采矿、地质、岩土、计算机、人工智能等专业的同学报考 +7 pin8023 2026-02-28 9/450 2026-03-03 14:05 by 尘曦03
[考研] 278求调剂 +3 满天星11_22 2026-03-02 3/150 2026-03-03 13:51 by Iveryant
[考研] 没上岸的看过来 +3 tangxiaotian 2026-03-01 3/150 2026-03-03 12:03 by emokidd
[考研] 调剂 +5 13853210211 2026-03-02 7/350 2026-03-03 11:42 by 13853210211
[考研] 材料325求调剂 30+3 mariusuki 2026-03-02 7/350 2026-03-03 11:14 by EBSD
[考研] 288求调剂 +3 少71.8 2026-03-02 5/250 2026-03-03 06:01 by tgxtgxtgx9
[考研] 0856材料调剂 +5 沿岸有贝壳OUC 2026-03-02 5/250 2026-03-02 20:31 by hypershenger
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +9 吃宵夜1 2026-02-28 11/550 2026-03-02 20:14 by hypershenger
[考研] 302材料工程求调剂 +5 Doleres 2026-03-01 6/300 2026-03-02 19:53 by 张晓芳0105
[考研] 275求调剂 +7 明远求学 2026-03-01 7/350 2026-03-02 19:22 by zhukairuo
[考研] 材料调剂 +3 恒顺自然 2026-03-02 3/150 2026-03-02 18:49 by L135790
[考研] 0703 总分319求调剂 +3 Xinyuu 2026-03-02 3/150 2026-03-02 17:20 by houyaoxu
[考研] 材料调剂 +6 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 7/350 2026-03-02 10:42 by Jy?
[考研] 291分工科求调剂 +9 science饿饿 2026-03-01 10/500 2026-03-01 18:55 by 18137688336
[考研] 311求调剂 +6 亭亭亭01 2026-03-01 6/300 2026-03-01 15:41 by 324616
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭