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scxryu木虫 (小有名气)
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DNA解旋酶与DNA的结合检测求助 已有1人参与
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各位老师,我最近用DNA解旋酶与单链DNA孵育,然后用琼脂糖凝胶电泳检测,有目的条带,比单独的单链DNA(50nt大小)会大一些,在200nt的位置。 但是,紧接着用单链DNA和双链DNA的杂合体(包含50nt和20bp区域)实验,琼脂糖电泳却没有目的条带,只有跟对照组一样大小的条带,条带在80nt附近。 是解旋酶无法结合到我的ssDNA-dsDNA的杂合体上吗? 孵育缓冲液用的是:50mM HEPES pH 8, 100mM乙酸钾,1mM EDTA。暂时还没有加入ATP和Mg2+,只是检测是否能结合。 |
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