24小时热门版块排行榜    

查看: 1560  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

蓝天白云_

新虫 (初入文坛)

[求助] 细胞实验遇到难题,实在没办法了求助请大家看一看 已有4人参与

各位老师好,我养的是HepG2肝癌细胞,我的实验需要测细胞内一些指标比如TC,TG,糖原等,把细胞接到12孔板或6孔板后,培养一天,细胞铺满90%后,弃掉培养液,PBS润洗,加入对照组和模型组样品组(对照组和造模液都是用无糖无酚红的DMEM加BSA和葡萄糖),加样的步骤是:先用移液枪弃掉培养基,,PBS润洗,加入对照组和模型组培养液,问题是每次加样品一天后所有的孔都会污染,但是所有的试剂用之前都过滤了,重复实验还是这样,滤膜没有问题,移液枪也没有问题,生物安全柜也没有问题,这些我都排除过了,过滤除菌后的试剂单独接到孔板里也没问题,正常传代培养的细胞也没有污染,细胞接到孔板里一天后,加样之前也也正常,只要一加样,一天后就污染,整个培养液都浑浊发臭,会不会是我操作的问题?重复实验很多次了,每次都很小心,并且试过12孔板中留两个孔不做任何处理,这两个孔就没有污染,其他的都污染了。真的没办法了,我导师说没遇到过这种情况,我怀疑是细胞本身有问题,或者是造模液

@gyesang @gyesang @hc-material 发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

junjieshao

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

6楼2020-05-30 04:22:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

xipha

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
加样品一天后所有的孔都会污染,不做任何处理,这两个孔就没有污染。这个基本可以肯定加样品的过程带入了污染产生的源头。建议把样品成分分别开来,一种加一个孔(比如糖加孔1,水加孔2,枪蘸一下孔3,PBS,DMEM。。。。),看看是哪个。
2楼2019-10-12 10:25:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Jor249143077

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

正常传代培养的细胞也没有污染,那应该可以排除细胞本身的问题了,另外实验器材排除分析已经做的很详细了。问题是加了造模液后培养一天后就污染,这是不是说明污染源头是造模液?如果可以买到试剂公司的现成的造模液,可以试一试
3楼2019-11-06 09:38:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cyy520520

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xipha at 2019-10-12 10:25:16
加样品一天后所有的孔都会污染,不做任何处理,这两个孔就没有污染。这个基本可以肯定加样品的过程带入了污染产生的源头。建议把样品成分分别开来,一种加一个孔(比如糖加孔1,水加孔2,枪蘸一下孔3,PBS,DMEM。。 ...

你好,同是做肝细胞建模,可以交流一下吗
下凡一趟真辛苦
4楼2020-05-27 11:13:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 290求调剂 +5 ADT 2026-03-11 5/250 2026-03-12 07:52 by Iveryant
[考研] 求调剂 +3 18880831720 2026-03-11 3/150 2026-03-12 07:32 by Iveryant
[考研] 材料与化工085600调剂求老师收留 +5 jiaanl 2026-03-11 5/250 2026-03-11 20:38 by ms629
[考研] 一志愿江南大学085701环境工程专硕总分287求调剂 +5 18266118446 2026-03-09 5/250 2026-03-11 16:51 by 2020015
[考研] 288求调剂 +13 王晓阳- 2026-03-09 18/900 2026-03-11 14:01 by Linda Hu
[考研] 290求调剂 +3 柯淮然 2026-03-10 8/400 2026-03-11 13:48 by 柯淮然
[考研] 083000环境科学与工程调剂 +8 mingmingry 2026-03-09 9/450 2026-03-11 10:23 by 沙漠之狐994
[考研] 307求调剂 +6 超级伊昂大王 2026-03-10 6/300 2026-03-10 22:46 by 星空星月
[考研] 085600 材料与化工 295 求调剂 +9 dream…… 2026-03-10 9/450 2026-03-10 22:24 by 剑诗杜康
[考研] 调剂 +5 呵唔哦豁 2026-03-10 5/250 2026-03-10 22:00 by 28375m
[考博] 26申博求助 +3 跳跃饼干 2026-03-10 4/200 2026-03-10 21:15 by Tntcnn
[考研] 327分求调剂086 +4 西红柿?小帅 2026-03-09 7/350 2026-03-10 14:47 by ruiyingmiao
[考研] 材料专硕调剂 +7 慕辰123 2026-03-05 10/500 2026-03-10 14:22 by peike
[考研] 材料与化工,291,求调剂 +12 咕噜咕噜123123 2026-03-05 13/650 2026-03-10 13:50 by allen-yin
[考研] 0703化学调剂 +7 小奶苍 2026-03-07 7/350 2026-03-10 05:17 by anny19840123
[考研] 337求调剂 +3 睡醒,。 2026-03-09 3/150 2026-03-09 10:02 by 求调剂zz
[考研] 求调剂 +3 拾柒12。 2026-03-08 3/150 2026-03-08 17:33 by bingxueer79
[考研] 085701环境工程专业,初试305,均过国家A区线 +7 卡卡来了@ 2026-03-07 8/400 2026-03-08 06:40 by 刘兵
[考研] 材料专硕323求调剂 +5 李白26 2026-03-07 5/250 2026-03-07 16:46 by njzyff
[考研] 材料调剂 +4 L9370 2026-03-05 4/200 2026-03-05 19:36 by caszguilin
信息提示
请填处理意见