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GST标签融合蛋白纯化所用的binding buffer以及elution buffer中DTT如何加？
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GST纯化柱的protocol中显示的结合缓冲液为PBS，洗脱缓冲液则为pH=8.0 50mM Tris-HCl +10mM 还原型谷胱甘肽。 其中，注意事项原文是这么说的：结合缓冲液或者洗脱缓冲液中可加入1-10mM DTT。这句话意思是说结合缓冲液或者洗脱缓冲液两者选其一加DTT吗？，若只在洗脱缓冲液中加DTT，会不会对还原性谷胱甘肽有影响？大家这种情况下一般是怎么使用DTT的呢？ 另外，洗脱缓冲液可以由tris-hcl改为在PBS中加入10mM 还原型谷胱甘肽吗？因为用tris-hcl作储存液纯化得到的蛋白做EMSA实验结合不是很明显。 |
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