应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » EMSA/ChIP » GST标签融合蛋白纯化所用的binding buffer以及elution buffer中DTT如何加？
51/1返回列表
查看: 3732  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

菱霖飞飞飞

新虫 (初入文坛)

[求助] GST标签融合蛋白纯化所用的binding buffer以及elution buffer中DTT如何加？

GST纯化柱的protocol中显示的结合缓冲液为PBS，洗脱缓冲液则为pH=8.0 50mM Tris-HCl +10mM 还原型谷胱甘肽。
        其中，注意事项原文是这么说的：结合缓冲液或者洗脱缓冲液中可加入1-10mM DTT。这句话意思是说结合缓冲液或者洗脱缓冲液两者选其一加DTT吗？，若只在洗脱缓冲液中加DTT，会不会对还原性谷胱甘肽有影响？大家这种情况下一般是怎么使用DTT的呢？
        另外，洗脱缓冲液可以由tris-hcl改为在PBS中加入10mM 还原型谷胱甘肽吗？因为用tris-hcl作储存液纯化得到的蛋白做EMSA实验结合不是很明显。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2019-08-19 11:16:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

DrawWon

新虫 (初入文坛)
您好，您换用PBS作储存液做EMSA了么？效果咋样。
赞一下 回复此楼
5楼2022-01-17 11:12:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

夺命十三幺

新虫 (小有名气)
请问你的GST标签切除了吗，我用的TEV酶一点也切不下来

发自小木虫IOS客户端
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2019-08-25 12:24:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

菱霖飞飞飞

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 夺命十三幺 at 2019-08-25 12:24:06
请问你的GST标签切除了吗，我用的TEV酶一点也切不下来

我没切，您知道我的这个问题中DTT在哪种溶液中加入吗？
赞一下 回复此楼
3楼2019-08-26 10:19:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夺命十三幺

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 菱霖飞飞飞 at 2019-08-26 10:19:15
我没切，您知道我的这个问题中DTT在哪种溶液中加入吗？...

我是在两种Buffer中都加了 这个应该没有影响

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
4楼2019-08-26 14:37:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料371求调剂 +3 鳄鱼? 2026-03-11 3/150 2026-03-11 05:15 by ?酱给调剂跪了
[考研] 312求调剂 +4 陌宸希 2026-03-10 4/200 2026-03-11 04:36 by anny19840123
[考研] 材料调剂，307分 +11 张泳铭1 2026-03-09 12/600 2026-03-10 22:52 by 星空星月
[考研] 288求调剂 +12 王晓阳- 2026-03-09 17/850 2026-03-10 22:16 by peike
[考研] 收调剂 +7 调剂的考研学生 2026-03-10 7/350 2026-03-10 17:57 by 麦茶汤圆
[考研] 328，0703考生求调剂，一志愿为东北师范大学 +3 观素律 2026-03-09 4/200 2026-03-10 15:58 by houyaoxu
[考研] 一志愿天大化工（085600）调剂总分338 +5 蔡大美女 2026-03-09 5/250 2026-03-10 14:44 by ruiyingmiao
[考研] 材料与化工求调剂 +11 与冬清宁 2026-03-07 14/700 2026-03-10 14:23 by Linda Hu
[考研] 一志愿郑州大学，学硕，物理化学， 333求调剂 +8 李魔女斗篷 2026-03-04 9/450 2026-03-10 10:33 by allen-yin
[考研] 0856求调剂 +3 squirtle11 2026-03-07 3/150 2026-03-09 09:54 by @飒飒飒飒
[考研] 理学287分求调剂 +4 看看我. 2026-03-05 4/200 2026-03-08 22:11 by qingfeng258
[考研] 安徽农业大学材料与化学学院0856材料招收调剂 +3 akakk47 2026-03-05 9/450 2026-03-08 21:03 by deng.z.1314
[考研] 0701-322 求调剂 +3 jiliuxian 2026-03-06 8/400 2026-03-08 19:31 by jiliuxian
[考研] 材料科学（0805）338 求调剂 +7 xiaokang3286 2026-03-07 7/350 2026-03-08 03:42 by lfhuang
[考研] 一志愿211 085600 280数二英二求调剂 +3 月山斜 2026-03-06 3/150 2026-03-07 18:56 by houyaoxu
[考研] 282求调剂 +7 夕～日 2026-03-05 8/400 2026-03-05 21:31 by zzpnuli111
[考研] 301求调剂 +4 李LJR 2026-03-04 4/200 2026-03-05 13:31 by Iveryant
[考研] 376求调剂 +3 王浩然sam 2026-03-04 3/150 2026-03-05 07:48 by bxbo
[考研] 307求调剂 +4 xuyuan111 2026-03-04 5/250 2026-03-04 20:39 by kakakapanpan
[考研] 求调剂 +7 博斯特525 2026-03-04 7/350 2026-03-04 18:09 by houyaoxu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭