应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » EMSA/ChIP » GST标签融合蛋白纯化所用的binding buffer以及elution buffer中DTT如何加？
51/1返回列表
查看: 2647  |  回复: 5
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者菱霖飞飞飞将赠送您 5 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

菱霖飞飞飞

新虫 (初入文坛)

[求助] GST标签融合蛋白纯化所用的binding buffer以及elution buffer中DTT如何加？

GST纯化柱的protocol中显示的结合缓冲液为PBS，洗脱缓冲液则为pH=8.0 50mM Tris-HCl +10mM 还原型谷胱甘肽。
        其中，注意事项原文是这么说的：结合缓冲液或者洗脱缓冲液中可加入1-10mM DTT。这句话意思是说结合缓冲液或者洗脱缓冲液两者选其一加DTT吗？，若只在洗脱缓冲液中加DTT，会不会对还原性谷胱甘肽有影响？大家这种情况下一般是怎么使用DTT的呢？
        另外，洗脱缓冲液可以由tris-hcl改为在PBS中加入10mM 还原型谷胱甘肽吗？因为用tris-hcl作储存液纯化得到的蛋白做EMSA实验结合不是很明显。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼2019-08-19 11:16:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我是软糖

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 夺命十三幺 at 2019-08-25 12:24:06
请问你的GST标签切除了吗，我用的TEV酶一点也切不下来

您好，请问您切下来了吗

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
6楼2024-04-26 09:07:14
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

夺命十三幺

新虫 (小有名气)
请问你的GST标签切除了吗，我用的TEV酶一点也切不下来

发自小木虫IOS客户端
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2019-08-25 12:24:06
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

菱霖飞飞飞

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 夺命十三幺 at 2019-08-25 12:24:06
请问你的GST标签切除了吗，我用的TEV酶一点也切不下来

我没切，您知道我的这个问题中DTT在哪种溶液中加入吗？
赞一下 回复此楼
3楼2019-08-26 10:19:15
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夺命十三幺

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 菱霖飞飞飞 at 2019-08-26 10:19:15
我没切，您知道我的这个问题中DTT在哪种溶液中加入吗？...

我是在两种Buffer中都加了 这个应该没有影响

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
4楼2019-08-26 14:37:32
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫 SCI英文润色翻译-EnPapers美团队-先修改后付款
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 科研之友阅读量近一周增加了200多。 +11 hdzw9071 2024-05-24 12/600 2024-05-26 09:38 by wanghuawei
[教师之家] 女博士高校择业三天之内签合同，求支招 +35 chengmy19 2024-05-23 48/2400 2024-05-26 09:02 by Quakerbird
[硕博家园] 文科博在木虫上存在感好低呀 +4 hahamyid 2024-05-25 6/300 2024-05-26 07:26 by hahamyid
[硕博家园] 研0 +4 控制调剂yl 2024-05-25 9/450 2024-05-25 18:21 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 河北省基金 50+3 晓晓爱翠翠 2024-05-23 19/950 2024-05-25 15:34 by 972937946
[论文投稿] 为什么有的影响因子高的期刊分区不高呢？ +9 安处一室 2024-05-21 9/450 2024-05-25 15:24 by dhsjg
[考博] 24年还有机会申博吗，求博导收留 +3 鄙人康康 2024-05-23 5/250 2024-05-24 23:11 by 鄙人康康
[有机交流] TsCl保护羟基为什么不反应 +9 853015158 2024-05-21 29/1450 2024-05-24 19:53 by 谢志新
[考博] 24级求博导 +3 Hddd9 2024-05-23 3/150 2024-05-24 18:44 by 安塔瓦拉多
[电化学] 2200mA锂离子电池设计 +3 小乐987 2024-05-23 3/150 2024-05-24 16:59 by 克拉妮nin
[基金申请] 审不上青基又非升即走的青椒 和 牢里踩缝纫机的犯人哪个活的更舒服一点？ +19 非非飞远了 2024-05-20 22/1100 2024-05-23 21:09 by chengmy19
[考博] 大扩招 +13 version211 2024-05-21 19/950 2024-05-23 20:46 by keyaner23
[有机交流] 苯磺酰氯与醇羟基反应 5+4 杨怼怼? 2024-05-22 12/600 2024-05-23 15:59 by mrzhl1986
[论文投稿] wiely投稿状态 10+3 甄小鱼 2024-05-23 3/150 2024-05-23 15:42 by 莱茵润色
[基金申请] 听说面青地E09已经送了么？ +6 叉烧吃叉烧 2024-05-21 9/450 2024-05-23 12:24 by 叉烧吃叉烧
[论文投稿] 关于通讯作者 5+4 irikiar 2024-05-21 4/200 2024-05-23 09:43 by moyoushang
[论文投稿] 投稿journal of energy chemistry +3 小可爱嘿呀 2024-05-21 3/150 2024-05-22 11:11 by xs74101122
[基金申请] 肿瘤口 +5 hml2091 2024-05-20 5/250 2024-05-21 22:48 by Liu131415
[论文投稿] 论文一审意见回来后发现实验程序编错了论证分析部分可能要大改 5+4 hshhenb 2024-05-20 5/250 2024-05-21 11:03 by bnullh
[论文投稿] SENSORS AND ACTUATORS B-CHEMICAL 15+4 荣小撇 2024-05-20 4/200 2024-05-21 10:07 by ca0yan9
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭