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屋后梧桐铁杆木虫 (职业作家)
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[求助]
慢病毒包装与真核表达质粒瞬转
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麻烦问一下各位前辈，我用真核表达的质粒顺转表达T7RNA聚合酶的质粒用抗生素筛选直至细胞没有出现死亡。然后转染检测质粒(绿色荧光，确定此检测质粒，体外转录后转染细胞后能出现荧光)，培养一段时间后，并没有观察到荧光，保证目的序列是完全正确的，质粒表达其他片段也正常，说明质粒也没问题。但是我看文献好多人用慢病毒包装做的(序列比对完全一样)，均能使检测质粒出现荧光。就想请教一下各位大神，这种情况是为什么？是因为慢病毒和质粒顺转效率差别太大吗，还是什么？烦请各位大神指点，在下感激不尽。另外有人如果有确定能表达RNA聚合酶的质粒，可以购买，或者交换。谢谢大家了?? @youlinglyw 发自小木虫Android客户端 |
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