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屋后梧桐铁杆木虫 (职业作家)
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慢病毒包装与真核表达质粒瞬转
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麻烦问一下各位前辈,我用真核表达的质粒顺转表达T7RNA聚合酶的质粒用抗生素筛选直至细胞没有出现死亡。然后转染检测质粒(绿色荧光,确定此检测质粒,体外转录后转染细胞后能出现荧光),培养一段时间后,并没有观察到荧光,保证目的序列是完全正确的,质粒表达其他片段也正常,说明质粒也没问题。但是我看文献好多人用慢病毒包装做的(序列比对完全一样),均能使检测质粒出现荧光。就想请教一下各位大神,这种情况是为什么?是因为慢病毒和质粒顺转效率差别太大吗,还是什么?烦请各位大神指点,在下感激不尽。另外有人如果有确定能表达RNA聚合酶的质粒,可以购买,或者交换。谢谢大家了?? @youlinglyw 发自小木虫Android客户端 |
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