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shier-

新虫 (小有名气)

[求助] 切胶回收浓度低 已有1人参与

PCR跑胶之后条带很亮,但是切胶回收浓度只有20+,求解决方案!谢谢各位!
我是制的大孔的,50ul全部点进一个孔,同基因点三个,切进一管,最后回收,加的25的elution buffer。

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xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by shier- at 2019-05-28 21:29:10
有二聚体呢,有的基因有多条带
...

在做PCR产物回收时,二聚体很小,基本结合不到回收柱的膜上。如果有的基因有多条带,换引物,用好一点的酶。切胶回收损失是很大。有多条带,而杂带在重新设计引物又无法去除时,加增加扩增的PCR管数(例如50微升一个体系,做10管)。
10楼2019-05-30 15:43:39
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xiaodengxin

金虫 (正式写手)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-05-26 22:41:03
没关系,直接做。或者下次换pcr 纯化kit

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2楼2019-05-26 19:48:15
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xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-05-28 22:28:21
你把电泳图贴上来看看,如果电泳图无明显杂带,直接用PCR产物回收试剂盒回收好了,既快效果又好。
3楼2019-05-27 18:58:50
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请回答2019

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

4楼2019-05-28 19:57:16
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