| 查看: 23536 | 回复: 8 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
Western blot 转膜使用甲醇问题求教 已有2人参与
|
|||
|
Western blot转膜液里为什么要加20%甲醇？？我搜索并得到以下解释，但不确定是否正确： 1、甲醇可以可以减少电流，从而降低产热。 疑问：直接设置更低的转膜电压不就可以了，何必加甲醇。 2、甲醇可以去除蛋白上的SDS 疑问：SDS去除了如何保证蛋白向正极移动。 3、不加甲醇蛋白转不上膜 疑问：这个说法的原理是什么？我曾用过购买的10× 转膜液， 直接用水稀释即可使用，蛋白完全能顺利转上膜，之后也blot出了条带。 |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有97人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
|
以下是我找到的答案，供大家参考。 https://www.researchgate.net/pos ... the_transfer_buffer 结论是：加了甲醇有利于蛋白的固定到膜上，特别是小分子的蛋白，对于大分子的蛋白可能是不利的，乙醇可以代替甲醇使用。 Thermo fisher官网的说明： Methanol in the transfer buffer aids in stripping the SDS from proteins in SDS-PAGE gels, increasing their ability to bind to support membranes. However, methanol can inactivate enzymes required for downstream analyses, and it can shrink the gel and membrane, which may increase the transfer time of large molecular weight proteins (150,000 Da) with poor solubility in methanol. In the absence of methanol, though, protein gels may swell in low ionic strength buffers, and therefore it is recommended to pre-swell gels for 30 minutes to 1 hour to prevent band distortion. |
7楼2019-04-12 19:41:58
lirol
金虫 (小有名气)
- 应助: 16 (小学生)
- 金币: 1416.1
- 散金: 25
- 红花: 4
- 帖子: 188
- 在线: 229.2小时
- 虫号: 2056003
- 注册: 2012-10-12
- 性别: MM
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
2楼2019-04-12 08:44:57
匿名
用户注销 (正式写手)
- 应助: 128 (高中生)
- 金币: 4550.4
- 散金: 50
- 红花: 22
- 帖子: 934
- 在线: 645.1小时
- 虫号: 0
- 注册: 2011-10-17
- 性别: GG
- 专业: 植物遗传学
3楼2019-04-12 08:54:57
4楼2019-04-12 15:46:32
