| 查看: 2271 | 回复: 5 | ||
[求助]
表达出来的蛋白大小正确有没有可能不是目的蛋白？ 已有2人参与
|
|
用大肠杆菌在M9 minimum media里用IPTG 诱导表达，加完IPTG即出现目标蛋白，SDSPAGE上大小和我们预期的一样。但是它死活不挂镍柱，N端有6个histag，试过加6M盐酸胍、6M尿素，变性条件纯化，以及和Ni2+ resin孵育过夜，传流上柱2次，仍然不挂柱。现在怀疑该蛋白是不是目的蛋白，打算做western。 但我还是想不通，这个蛋白大小和目的蛋白一样，加完IPTG后出现的，随着诱导时间的加长而增强，难道会不是目标蛋白？有没有人曾经碰到过这种情况？ |
回复此楼» 猜你喜欢
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有90人回复
-
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
-
AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点
已经有0人回复
-
ADC标杆分子T-DM1全解析：从结构设计到实验室应用的技术要点
已经有0人回复
-
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？
已经有0人回复
-
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复
-
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
-
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用
已经有0人回复
-
SHP2 变构抑制剂 Sitneprotafib：从作用机制到科研试剂选型要点
已经有0人回复
龙猫测 
木虫 (文坛精英)
- 应助: 204 (大学生)
- 金币: 1336.2
- 散金: 13337
- 红花: 9
- 帖子: 10722
- 在线: 95.1小时
- 虫号: 13929841
- 注册: 2019-01-29
- 专业: 计算机网络
2楼2019-03-30 17:29:53
yubeihong
铁杆木虫 (职业作家)
- 应助: 20 (小学生)
- 金币: 7542.8
- 散金: 605
- 红花: 40
- 帖子: 3057
- 在线: 641.1小时
- 虫号: 253258
- 注册: 2006-05-20
- 性别: GG
- 专业: 生物化工与食品化工
3楼2019-04-01 14:10:42
renjunr7raul
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 23.3
- 散金: 10
- 帖子: 15
- 在线: 10.4小时
- 虫号: 310261
- 注册: 2006-12-24
- 专业: 生物大分子结构与功能
4楼2019-04-02 10:01:29
5楼2019-04-05 07:03:23
renjunr7raul
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 23.3
- 散金: 10
- 帖子: 15
- 在线: 10.4小时
- 虫号: 310261
- 注册: 2006-12-24
- 专业: 生物大分子结构与功能
6楼2019-04-05 21:09:49
20