| 查看: 2156 | 回复: 5 | ||
[求助]
表达出来的蛋白大小正确有没有可能不是目的蛋白？ 已有2人参与
|
|
用大肠杆菌在M9 minimum media里用IPTG 诱导表达，加完IPTG即出现目标蛋白，SDSPAGE上大小和我们预期的一样。但是它死活不挂镍柱，N端有6个histag，试过加6M盐酸胍、6M尿素，变性条件纯化，以及和Ni2+ resin孵育过夜，传流上柱2次，仍然不挂柱。现在怀疑该蛋白是不是目的蛋白，打算做western。 但我还是想不通，这个蛋白大小和目的蛋白一样，加完IPTG后出现的，随着诱导时间的加长而增强，难道会不是目标蛋白？有没有人曾经碰到过这种情况？ |
回复此楼» 猜你喜欢
拉坦前列腺素(Latanoprost)：前列腺素F2α衍生物如何成为青光眼一线用药
已经有0人回复
-
卟啉家族中的明星分子：MESO-四(3,5-二溴-4-羟基苯基)卟啉的性质与制备
已经有1人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有254人回复
-
宠物寄生虫防治：氟雷拉纳阻断GABA受体，持效12周驱杀跳蚤蜱虫
已经有0人回复
-
为呼吸打开通道：依伐卡托的科学之旅
已经有1人回复
-
Dordaviprone（ONC201）：小分子药物在中线胶质瘤中的应用
已经有0人回复
-
依喜替康：新型喜树碱衍生物的研究进展
已经有1人回复
-
膀胱癌靶向治疗新选择：厄达替尼作用机制与耐药研究进展
已经有0人回复
-
从水母到实验室：腔肠素的发现历程与生物发光奥秘
已经有1人回复
-
线粒体氧化磷酸化的新靶点：S-Gboxin的发现与研究进展
已经有0人回复
-
PROTAC药物开发选择VHL配体：MDK-7526以87%出口向量占有率成首选
已经有0人回复
龙猫测 
木虫 (文坛精英)
- 应助: 204 (大学生)
- 金币: 1336.2
- 散金: 12712
- 红花: 9
- 帖子: 10722
- 在线: 95.1小时
- 虫号: 13929841
- 注册: 2019-01-29
- 专业: 计算机网络
2楼2019-03-30 17:29:53
yubeihong
铁杆木虫 (职业作家)
- 应助: 20 (小学生)
- 金币: 7537.3
- 散金: 605
- 红花: 40
- 帖子: 3051
- 在线: 641小时
- 虫号: 253258
- 注册: 2006-05-20
- 性别: GG
- 专业: 生物化工与食品化工
3楼2019-04-01 14:10:42
renjunr7raul
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 23.3
- 散金: 10
- 帖子: 15
- 在线: 10.4小时
- 虫号: 310261
- 注册: 2006-12-24
- 专业: 生物大分子结构与功能
4楼2019-04-02 10:01:29
5楼2019-04-05 07:03:23
renjunr7raul
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 23.3
- 散金: 10
- 帖子: 15
- 在线: 10.4小时
- 虫号: 310261
- 注册: 2006-12-24
- 专业: 生物大分子结构与功能
6楼2019-04-05 21:09:49
10