应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 表达出来的蛋白大小正确有没有可能不是目的蛋白？
51/1返回列表
查看: 2078  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

tq0ax1r

新虫 (初入文坛)

[求助] 表达出来的蛋白大小正确有没有可能不是目的蛋白？ 已有2人参与

用大肠杆菌在M9 minimum media里用IPTG 诱导表达，加完IPTG即出现目标蛋白，SDSPAGE上大小和我们预期的一样。但是它死活不挂镍柱，N端有6个histag，试过加6M盐酸胍、6M尿素，变性条件纯化，以及和Ni2+ resin孵育过夜，传流上柱2次，仍然不挂柱。现在怀疑该蛋白是不是目的蛋白，打算做western。

但我还是想不通，这个蛋白大小和目的蛋白一样，加完IPTG后出现的，随着诱导时间的加长而增强，难道会不是目标蛋白？有没有人曾经碰到过这种情况？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2019-03-30 11:08:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tq0ax1r

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by renjunr7raul at 2019-04-02 10:01:29
一切皆有可能。。用的柱子纯化别的蛋白好使吗

别的蛋白可以纯化。这个蛋白用了InVision Histag Stain检测Histag,条带很浅，难说有没有Histag
赞一下 回复此楼
5楼2019-04-05 07:03:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

龙猫测

木虫 (文坛精英)
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 应助指数-1, 无应助 2019-04-05 08:14:39
上个图看看，做个 WB 确认一下
赞一下 回复此楼
2楼2019-03-30 17:29:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yubeihong

铁杆木虫 (职业作家)
试试purimag的Ni磁珠

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
3楼2019-04-01 14:10:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

renjunr7raul

新虫 (初入文坛)
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 应助指数-1, 无应助 2019-04-05 08:14:26
一切皆有可能。。用的柱子纯化别的蛋白好使吗
赞一下 回复此楼
4楼2019-04-02 10:01:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 梁成伟老师课题组欢迎你的加入 +5 一鸭鸭哟 2026-03-14 6/300 2026-03-14 22:29 by lllllcsjsj
[考研] 274求调剂 +3 时间点 2026-03-13 3/150 2026-03-14 22:27 by 钓鱼佬as
[考研] 0703化学求调剂，总分309分，一志愿华南师范 +4 花与叶@ 2026-03-08 4/200 2026-03-14 04:40 by JourneyLucky
[考研] 26考研求调剂b区高校 +3 北陌追雪 2026-03-08 4/200 2026-03-14 03:47 by JourneyLucky
[考研] 一志愿哈工大材料 初试成绩323 +3 手机用户 2026-03-08 3/150 2026-03-14 03:27 by JourneyLucky
[考研] 一志愿浙江大学0856材料与化工求调剂 +4 yansheng@211 2026-03-09 5/250 2026-03-14 02:10 by JourneyLucky
[考研] 求调剂！ +4 朔朔话 2026-03-09 4/200 2026-03-14 01:38 by JourneyLucky
[考研] 295复试调剂 +5 简木ChuFront 2026-03-09 5/250 2026-03-14 01:29 by JourneyLucky
[考研] 云南财经大学信息学院计算机学硕专硕学位点 +3 zjptai 2026-03-10 5/250 2026-03-14 01:23 by 飞行琦
[考研] 考研材料与化工，求调剂 +8 戏精丹丹丹 2026-03-09 8/400 2026-03-14 01:14 by JourneyLucky
[考研] 285 求调剂 资源与环境 一志愿北京化工大学 +3 未名考生 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:04 by JourneyLucky
[考研] 求材料调剂 +5 隔壁陈先生 2026-03-12 5/250 2026-03-13 22:03 by 星空星月
[考研] ［0860］321分求调剂，ab区皆可 +4 宝贵热 2026-03-13 4/200 2026-03-13 22:01 by 星空星月
[考研] 0856材料与化工301求调剂 +5 奕束光 2026-03-13 5/250 2026-03-13 22:00 by 星空星月
[考研] 304求调剂 +7 7712b 2026-03-13 7/350 2026-03-13 21:42 by peike
[考研] 085600材料与化工 309分请求调剂 +7 dtdxzxx 2026-03-12 8/400 2026-03-13 14:43 by jxchenghu
[考研] 材料301分求调剂 +5 Liyouyumairs 2026-03-12 5/250 2026-03-13 14:42 by JourneyLucky
[考研] 282分材料专业求调剂院校 +18 枫桥ZL 2026-03-09 25/1250 2026-03-13 10:47 by 白夜悠长
[考研] 一志愿河海大学085900土木水利专硕279求调剂不挑专业 +4 SunWwWwWw 2026-03-10 8/400 2026-03-13 02:23 by SunWwWwWw
[考研] 083000环境科学与工程调剂 +8 mingmingry 2026-03-09 9/450 2026-03-11 10:23 by 沙漠之狐994
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭