应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 表达出来的蛋白大小正确有没有可能不是目的蛋白？
51/1返回列表
查看: 2079  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

tq0ax1r

新虫 (初入文坛)

[求助] 表达出来的蛋白大小正确有没有可能不是目的蛋白？ 已有2人参与

用大肠杆菌在M9 minimum media里用IPTG 诱导表达，加完IPTG即出现目标蛋白，SDSPAGE上大小和我们预期的一样。但是它死活不挂镍柱，N端有6个histag，试过加6M盐酸胍、6M尿素，变性条件纯化，以及和Ni2+ resin孵育过夜，传流上柱2次，仍然不挂柱。现在怀疑该蛋白是不是目的蛋白，打算做western。

但我还是想不通，这个蛋白大小和目的蛋白一样，加完IPTG后出现的，随着诱导时间的加长而增强，难道会不是目标蛋白？有没有人曾经碰到过这种情况？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2019-03-30 11:08:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tq0ax1r

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by renjunr7raul at 2019-04-02 10:01:29
一切皆有可能。。用的柱子纯化别的蛋白好使吗

别的蛋白可以纯化。这个蛋白用了InVision Histag Stain检测Histag,条带很浅，难说有没有Histag
赞一下 回复此楼
5楼2019-04-05 07:03:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

龙猫测

木虫 (文坛精英)
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 应助指数-1, 无应助 2019-04-05 08:14:39
上个图看看，做个 WB 确认一下
赞一下 回复此楼
2楼2019-03-30 17:29:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yubeihong

铁杆木虫 (职业作家)
试试purimag的Ni磁珠

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
3楼2019-04-01 14:10:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

renjunr7raul

新虫 (初入文坛)
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 应助指数-1, 无应助 2019-04-05 08:14:26
一切皆有可能。。用的柱子纯化别的蛋白好使吗
赞一下 回复此楼
4楼2019-04-02 10:01:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料与化工 323 英一+数二+物化，一志愿：哈工大 本人本科双一流 +4 自由的_飞翔 2026-03-13 5/250 2026-03-14 19:39 by hmn_wj
[考研] 0703化学调剂，求各位老师收留 +6 秋有木北 2026-03-14 6/300 2026-03-14 18:18 by houyaoxu
[考研] 学硕285求调剂 +13 Wisjxn 2026-03-12 46/2300 2026-03-14 10:33 by JourneyLucky
[考研] 一志愿天大化工专调剂总分338 +3 蔡大美女 2026-03-08 3/150 2026-03-14 03:12 by JourneyLucky
[考研] 328，0703考生求调剂，一志愿为东北师范大学 +4 观素律 2026-03-09 5/250 2026-03-14 01:24 by JourneyLucky
[考研] 一志愿安徽大学材料工程专硕313分，求调剂的学校 +8 Yu先生 2026-03-10 10/500 2026-03-14 01:04 by JourneyLucky
[考研] 312求调剂 +6 陌宸希 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:40 by JourneyLucky
[考研] 318求调剂 +3 李新光 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:21 by JourneyLucky
[考研] 材料371求调剂 +9 鳄鱼? 2026-03-11 11/550 2026-03-13 22:53 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +6 Mochaaaa 2026-03-12 7/350 2026-03-13 22:18 by 星空星月
[考研] 工科，求调剂 +3 我887 2026-03-11 3/150 2026-03-13 21:39 by JourneyLucky
[考研] 332求调剂 +3 Zz版 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:36 by 18595523086
[考研] 求调剂 +5 一定有学上- 2026-03-12 5/250 2026-03-13 18:31 by ms629
[考研] 0703化学求调剂 +7 绿豆芹菜汤 2026-03-12 7/350 2026-03-13 17:25 by njzyff
[考研] 307求调剂 +5 超级伊昂大王 2026-03-12 5/250 2026-03-13 15:56 by 棒棒球手
[论文投稿] 投稿问题 5+4 星光灿烂xt 2026-03-12 6/300 2026-03-13 14:17 by god_tian
[考研] 材料调剂，307分 +13 张泳铭1 2026-03-09 17/850 2026-03-13 11:09 by 薛云鹏
[考研] 289求调剂 +3 李政莹 2026-03-12 3/150 2026-03-13 11:02 by 求调剂zz
[考研] 工科0856专硕化学工程269能调剂吗 +10 我想读研11 2026-03-10 10/500 2026-03-13 10:14 by Yuyi.
[考研] 321求调剂（食品/专硕） +3 xc321 2026-03-12 6/300 2026-03-13 08:45 by xc321
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭