应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 请问有用过pPICZA这个质粒的嘛？
121/2返回列表12下一页
查看: 1366  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

青青宁呢

新虫 (初入文坛)

[求助] 请问有用过pPICZA这个质粒的嘛？ 已有2人参与

请问有用过pPICZA这个质粒的嘛？大家做双酶切线性化的时候用的什么酶？以及测序用的引物是什么呢？有关于这个质粒的很多问题想咨询一下。

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2019-03-02 12:52:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-03-02 16:13:15
线性化用的单酶切来的，有三个酶切位点可供选择，分别是SacI, PmeI，BstI；5' 测序引物及序列:        5′ AOX1:5′-GACTGGTTCCAATTGACAAGC-3′
3' 测序引物及序列:        3′ AOX1:5′-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3′
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2019-03-02 14:37:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

biosci

捐助贵宾 (职业作家)
有说明书说的很详细，看不明白可以再来问我

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2019-03-04 22:41:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

青青宁呢

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 渊博震天 at 2019-03-02 14:37:38
线性化用的单酶切来的，有三个酶切位点可供选择，分别是SacI, PmeI，BstI；5' 测序引物及序列:        5′ AOX1:5′-GACTGGTTCCAATTGACAAGC-3′
3' 测序引物及序列:        3′ AOX1:5′-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3′

我用的是Kpn1和Apa1进行的双酶切，但是后面连接转化后不长菌。有人说，双酶切的位点距离小于50bp，酶切很容易不成功或者是单酶切。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2019-03-06 18:08:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

青青宁呢

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by biosci at 2019-03-04 22:41:08
有说明书说的很详细，看不明白可以再来问我

我用的是Kpn1和Apa1进行的双酶切，但是后面连接转化后不长菌。有人说，双酶切的位点距离小于50bp，酶切很容易不成功或者是单酶切。我现在不知道自己的问题到底出在哪里

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2019-03-06 18:09:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

werq63

金虫 (著名写手)
不长菌说明酶切成功了，切不开或者单切会长很多的

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
6楼2019-03-06 19:44:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

werq63

金虫 (著名写手)
看看是不是插入片段的问题

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2019-03-06 19:44:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

青青宁呢

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by werq63 at 2019-03-06 19:44:11
不长菌说明酶切成功了，切不开或者单切会长很多的

插入片段我连接到pmd18载体中测序了，没有问题。如果没切开的话应该会长，如果是单酶切呢？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2019-03-06 20:46:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

werq63

金虫 (著名写手)
单切自连很好连的

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
9楼2019-03-06 22:07:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

青青宁呢

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by werq63 at 2019-03-06 22:07:39
单切自连很好连的

那你觉得还可能是哪里出现问题呢？我做了快半个月了。就是连不上。谢谢谢谢

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
10楼2019-03-06 22:47:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 青青宁呢 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 5lbyq5wrhb 2026-02-07 4/200 2026-02-08 08:47 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 5lbyq5wrhb 2026-02-07 4/200 2026-02-08 08:46 by vs90ilomwc
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 3rkserf6qr 2026-02-07 5/250 2026-02-08 08:32 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 3rkserf6qr 2026-02-07 4/200 2026-02-08 08:27 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +5 2h7du0nuhk 2026-02-07 6/300 2026-02-08 08:26 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +5 2h7du0nuhk 2026-02-07 6/300 2026-02-08 08:12 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 6/300 2026-02-08 08:07 by vs90ilomwc
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 07:52 by vs90ilomwc
[找工作] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 07:46 by vs90ilomwc
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:32 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:27 by vs90ilomwc
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:26 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:07 by vs90ilomwc
[硕博家园] 博士延得我，科研能力直往上蹿 +8 偏振片 2026-02-02 8/400 2026-02-08 06:52 by liyeqik
[教师之家] 有院领导为了换新车，用横向课题经费买了俩车 +7 瞬息宇宙 2026-02-04 7/350 2026-02-07 21:47 by tfang
[有机交流] 酰胺脱乙酰基 10+5 chibby 2026-02-03 12/600 2026-02-07 19:29 by 江东闲人
[基金申请] 有时候真觉得大城市人没有县城人甚至个体户幸福 +9 苏东坡二世 2026-02-04 10/500 2026-02-07 12:37 by 小毛球
[考博] 天津大学招2026.09的博士生，欢迎大家推荐交流（博导是本人） +4 a793625982 2026-02-05 5/250 2026-02-07 10:57 by a793625982
[公派出国] CSC & MSCA 博洛尼亚大学能源材料课题组博士/博士后招生｜MSCA经费充足、排名优 +4 雨念 2026-02-01 6/300 2026-02-06 23:32 by MelissaPon
[基金申请] 面上项目申报 +3 Tide man 2026-02-01 3/150 2026-02-05 22:56 by god_tian
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭