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14026sun

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 225.5
帖子: 34
在线: 2.3小时
虫号: 3024375

[交流] 大肠杆菌高密度发酵溶氧控制

请问大家做大肠杆菌工业发酵时，一定要控制溶氧在一定水平以上吗？一般罐上培养前几个小时因为菌体密度比较低，一般还有溶氧显示，可是长到OD600＝10左右，受限于通气量和搅拌就不会有溶氧显示了。
那么发酵全程要求有溶氧显示是怎么实现的呢？只是简单的提高通气、搅拌？还是要通过精准的控制碳源或者氮源流加来实现？
另外想请教一下，大肠杆菌高密度发酵实现的关键是什么？微量元素？通气量？还是什么？先谢谢大家！期待……

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1楼 2019-02-10 20:33:31

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白白白黑呀

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 28.3
帖子: 5
在线: 8.2小时
虫号: 5841364

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

请问各位
小弟最近在做高密度发酵，因为之前实验室都没做过，所以在摸索阶段。目前遇到的问题是菌体浓度上不去，OD600最大只能到30~40左右。

5L发酵罐，培养基主要成分：20g/L酵母浸粉，5g/L葡萄糖，10g/L NaCl, 15g/L磷酸氢二钾，5g/L磷酸二氢钾

通压缩空气

菌种：BL21(DE3)，做重组蛋白表达（无毒）

补料：葡萄糖，pH反馈补料

37℃培养6h左右初糖耗尽，这时候转速达到1000rpm，通气量3vvm，溶氧只有20%左右，OD600只有15左右，后面接着补料，OD600达到25左右就长不上去了，溶氧也只有2%，此时降温到28度诱导，最终也只涨到35左右。

请教各位大神如何改进实现高密度啊？看别人都可以做到OD600在100以上的。。。