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[交流]
大肠杆菌高密度发酵溶氧控制
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请问大家做大肠杆菌工业发酵时,一定要控制溶氧在一定水平以上吗?一般罐上培养前几个小时 因为菌体密度比较低,一般还有溶氧显示,可是长到OD600=10左右,受限于通气量和搅拌就不会有溶氧显示了。 那么发酵全程要求有溶氧显示是怎么实现的呢?只是简单的提高通气、搅拌?还是要通过精准的控制碳源或者氮源流加来实现? 另外想请教一下,大肠杆菌高密度发酵实现的关键是什么?微量元素?通气量?还是什么?先谢谢大家!期待…… 发自小木虫IOS客户端 |
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请问各位 小弟最近在做高密度发酵,因为之前实验室都没做过,所以在摸索阶段。目前遇到的问题是菌体浓度上不去,OD600最大只能到30~40左右。 5L发酵罐,培养基主要成分:20g/L酵母浸粉,5g/L葡萄糖,10g/L NaCl, 15g/L磷酸氢二钾,5g/L磷酸二氢钾 通压缩空气 菌种:BL21(DE3),做重组蛋白表达(无毒) 补料:葡萄糖,pH反馈补料 37℃培养6h左右初糖耗尽,这时候转速达到1000rpm,通气量3vvm,溶氧只有20%左右,OD600只有15左右,后面接着补料,OD600达到25左右就长不上去了,溶氧也只有2%,此时降温到28度诱导,最终也只涨到35左右。 请教各位大神如何改进实现高密度啊?看别人都可以做到OD600在100以上的。。。 |
8楼2019-05-22 10:19:47
9楼2019-05-30 01:58:18
10楼2021-08-11 13:59:38
简单回复
time882楼
2019-02-10 21:12
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14026sun(金币+5): 谢谢参与
14026sun3楼
2019-02-11 10:18
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额。。。 发自小木虫IOS客户端







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14026sun