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pc1453

金虫 (小有名气)

[求助] 原核表达如何确定有表达 已有3人参与

原核表达过程中已经测序正确了,预试验的胶图上预测蛋白大小处没有明显条带,这时该如何判断是否有表达呢,又该如何确定表达的位置以及实际的蛋白大小呢
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

恩,你这是没有表达,测序只是基因层面的验证,代表你的基因构建正确,是否有表达是蛋白层面的结果,基因经历转录翻译这个过程变成蛋白。蛋白大小是根据基因bp计算的,通过软件就能计算出来。怎么判断有表达,比如你的蛋白30kd,在sdspage胶上,marker对应的30kd处左右,是否有明显的条带,有就是有表达,另外你可以最WB验证灵敏度更高
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
11楼2019-02-14 11:46:41
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wuhu0612331

铜虫 (正式写手)

2楼2019-01-21 10:49:19
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pc1453

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wuhu0612331 at 2019-01-21 10:49:19
那就是没有了

测序也正确,确定带有目的基因的质粒也转化进去了,怎么会没有表达呢
3楼2019-01-21 13:19:33
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melyliang

新虫 (正式写手)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-04-21 22:46:11
有标签的话可以做个western

发自小木虫Android客户端
4楼2019-01-21 17:01:21
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