应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 蛋白表达
311/1返回列表
查看: 2459  |  回复: 30
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

郭高杰

新虫 (正式写手)

[交流] 蛋白表达

在用大肠Rosetta表达，载体pet-28a,表达里氏木霉来源的swollenin蛋白，20度，0.1mM IPTG诱导，收集菌体后，超声破碎，跑蛋白胶，发现生成的是包涵体，请问接下来应该怎么变性复性，得到有活性的蛋白？
回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

young1983

» 猜你喜欢

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2019-01-14 21:13:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biosci

捐助贵宾 (职业作家)
★ ★
郭高杰(金币+1): 谢谢参与
drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流 2019-01-15 06:42:22
先不要着急复性包涵体，建议换个载体试试，说不定就是可溶蛋白了

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2019-01-14 21:15:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

郭高杰

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2019-01-14 21:15:56
先不要着急复性包涵体，建议换个载体试试，说不定就是可溶蛋白了

大肠表达真核细胞来源的蛋白，很容易形成包涵体，想着接着往下做，有什么好方法吗？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2019-01-14 21:21:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2011sp

铁杆木虫 (著名写手)
★
郭高杰(金币+1): 谢谢参与
你4度诱导试试

发自小木虫Android客户端
回复此楼
15楼2019-01-15 08:45:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

young1983

木虫 (正式写手)
★
郭高杰(金币+1): 谢谢参与
送红花一朵
芽孢杆菌分泌的真核来源的重组蛋白具有天然构象和生物活性，避免形成包涵体；表达周期短，蛋白产率高，可以分泌到细胞外。

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
17楼2019-01-15 10:13:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhlq_mail

铜虫 (小有名气)
★
郭高杰(金币+1): 谢谢参与
我一般16度表达，同时也可以使用酵母系统试一下解决包涵体问题。
赞一下 回复此楼
18楼2019-01-15 10:32:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名


★
郭高杰(金币+1): 谢谢参与
本帖仅楼主可见
赞一下
19楼2019-01-15 11:53:30
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

郭高杰

新虫 (正式写手)
引用回帖:
19楼: Originally posted by 立林258369 at 2019-01-15 11:53:30
可以尝试真核表达，例如酵母表达

用毕赤酵母表达，可是九月份表达出来过，在之后重复不出来了

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
20楼2019-01-15 14:36:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

假大空

木虫之王 (文学泰斗)
★
郭高杰(金币+1): 谢谢参与
好运
回复此楼
27楼2019-01-20 09:36:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

实验white

新虫 (初入文坛)
★
郭高杰(金币+1): 谢谢参与
你可以试着再改变下诱导温度，如果还是没有活性，那就只能复性了。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
28楼2019-01-21 00:00:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

迭芳芳儿

银虫 (正式写手)
★
郭高杰(金币+1): 谢谢参与
尿素溶解

发自小木虫Android客户端
回复此楼
29楼2019-03-09 10:56:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

昔归@&

新虫 (正式写手)
换个载体

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
30楼2020-04-01 10:00:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tjw0824

木虫 (著名写手)
★
郭高杰(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
4楼: Originally posted by 郭高杰 at 2019-01-14 21:21:46
大肠表达真核细胞来源的蛋白，很容易形成包涵体，想着接着往下做，有什么好方法吗？
...

换载体，尝试各种融合标签，包涵体复性不太好做，得率不高

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
31楼2020-06-19 07:36:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
二舅娘12503楼
2019-01-14 21:17   回复  
郭高杰(金币+1): 谢谢参与
发自小木虫Android客户端
nono20095楼
2019-01-14 21:37   回复  
郭高杰(金币+1): 谢谢参与
·
tzynew6楼
2019-01-14 22:27   回复  
郭高杰(金币+1): 谢谢参与
Biotage7楼
2019-01-14 22:46   回复  
郭高杰(金币+1): 谢谢参与
sz_kebaoyuan8楼
2019-01-14 22:49   回复  
郭高杰(金币+1): 谢谢参与
等闲识得9楼
2019-01-14 23:03   回复  
郭高杰(金币+1): 谢谢参与
。 发自小木虫Android客户端
slytjiaofei10楼
2019-01-14 23:20   回复  
郭高杰(金币+1): 谢谢参与
guimu11楼
2019-01-14 23:34   回复  
郭高杰(金币+1): 谢谢参与
q 发自小木虫Android客户端
syhorchid12楼
2019-01-14 23:50   回复  
郭高杰(金币+1): 谢谢参与
xiaoqiuqiu2013楼
2019-01-15 01:16   回复  
郭高杰(金币+1): 谢谢参与
youngen14楼
2019-01-15 06:46   回复  
郭高杰(金币+1): 谢谢参与
gggggguo16楼
2019-01-15 08:47   回复  
郭高杰(金币+1): 谢谢参与
发自小木虫Android客户端
miaojiabing21楼
2019-01-15 15:43   回复  
郭高杰(金币+1): 谢谢参与
紫然若依22楼
2019-01-15 16:03   回复  
郭高杰(金币+1): 谢谢参与
发自小木虫Android客户端
youngen23楼
2019-01-20 09:08   回复  
youngen24楼
2019-01-20 09:11   回复  
youngen25楼
2019-01-20 09:16   回复  
youngen26楼
2019-01-20 09:17   回复  
相关版块跳转 我要订阅楼主 郭高杰 的主题更新
311/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭