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郭高杰

新虫 (正式写手)

[交流] 蛋白表达

在用大肠Rosetta表达，载体pet-28a,表达里氏木霉来源的swollenin蛋白，20度，0.1mM IPTG诱导，收集菌体后，超声破碎，跑蛋白胶，发现生成的是包涵体，请问接下来应该怎么变性复性，得到有活性的蛋白？
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young1983

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1楼 2019-01-14 21:13:39
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tjw0824

木虫 (著名写手)
★
郭高杰(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
4楼: Originally posted by 郭高杰 at 2019-01-14 21:21:46
大肠表达真核细胞来源的蛋白，很容易形成包涵体，想着接着往下做，有什么好方法吗？
...

换载体，尝试各种融合标签，包涵体复性不太好做，得率不高

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31楼2020-06-19 07:36:00
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biosci

捐助贵宾 (职业作家)
★ ★
郭高杰(金币+1): 谢谢参与
drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流 2019-01-15 06:42:22
先不要着急复性包涵体，建议换个载体试试，说不定就是可溶蛋白了

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2楼2019-01-14 21:15:56
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郭高杰

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2019-01-14 21:15:56
先不要着急复性包涵体，建议换个载体试试，说不定就是可溶蛋白了

大肠表达真核细胞来源的蛋白，很容易形成包涵体，想着接着往下做，有什么好方法吗？

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4楼2019-01-14 21:21:46
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guimu11楼
2019-01-14 23:34   回复  
郭高杰(金币+1): 谢谢参与
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二舅娘12503楼
2019-01-14 21:17   回复  
郭高杰(金币+1): 谢谢参与
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等闲识得9楼
2019-01-14 23:03   回复  
郭高杰(金币+1): 谢谢参与
。 发自小木虫Android客户端
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