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郭高杰

新虫 (正式写手)


[交流] 蛋白表达

在用大肠Rosetta表达,载体pet-28a,表达里氏木霉来源的swollenin蛋白,20度,0.1mM IPTG诱导,收集菌体后,超声破碎,跑蛋白胶,发现生成的是包涵体,请问接下来应该怎么变性复性,得到有活性的蛋白?
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tjw0824

木虫 (著名写手)



郭高杰(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
4楼: Originally posted by 郭高杰 at 2019-01-14 21:21:46
大肠表达真核细胞来源的蛋白,很容易形成包涵体,想着接着往下做,有什么好方法吗?
...

换载体,尝试各种融合标签,包涵体复性不太好做,得率不高

发自小木虫Android客户端
31楼2020-06-19 07:36:00
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biosci

捐助贵宾 (职业作家)


★ ★
郭高杰(金币+1): 谢谢参与
drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流 2019-01-15 06:42:22
先不要着急复性包涵体,建议换个载体试试,说不定就是可溶蛋白了

发自小木虫Android客户端
2楼2019-01-14 21:15:56
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郭高杰

新虫 (正式写手)


引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2019-01-14 21:15:56
先不要着急复性包涵体,建议换个载体试试,说不定就是可溶蛋白了

大肠表达真核细胞来源的蛋白,很容易形成包涵体,想着接着往下做,有什么好方法吗?

发自小木虫Android客户端
4楼2019-01-14 21:21:46
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guimu11楼
2019-01-14 23:34   回复  
郭高杰(金币+1): 谢谢参与
q 发自小木虫Android客户端
2019-01-14 21:17   回复  
郭高杰(金币+1): 谢谢参与
发自小木虫Android客户端
2019-01-14 23:03   回复  
郭高杰(金币+1): 谢谢参与
发自小木虫Android客户端
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