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材料经全谱测到了多种黄酮类物质，自己提取的黄酮经高效液相却只... 已有4人参与
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材料经全谱测到了多种黄酮类物质，自己提取的黄酮经高效液相却只检测到2种，这是为什么？ 我先用石油醚对材料粉末进行了脱脂脱色处理(脱色不完全)，再称取1g粉末用70％的甲醇提取酚类物质，经旋蒸浓缩后(不是油膏状，还是液体)用50％的二甲基亚砜(蒸馏水＋二甲基亚砜)定容为15mL，直接送去测黄酮，结果只测到了两种，求助前辈们这是我提取的浓度太低了吗，还是有其他什么原因会造成这样？对方要求我重新送样过去，我不知道该怎么再优化了，请求各位大神的指点。 这个是出钱让别人测的，这次测不出来就相当于钱白费了，一般高效液相除了浓度太低检测不出来之外还有会有什么原因? 为什么提取多酚类物质要旋转蒸发浓缩，目的只是增加它的浓度吗，那我在做提取条件优化的时候有好多样需要旋蒸，可以不旋蒸直接定容之后在分光光度计上测吗，一个刚进实验室的童鞋，请求各位帮忙分析一下。 @starseacow 发自小木虫Android客户端 |
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【答案】应助回帖
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1黄酮类化合物的溶解性千差万别，基础的黄酮类化合物一般都是溶于甲醇乙醇等简单有机物的，有些也可以溶于油脂等其他高分子有机物中。成苷后一般水溶性会增加，但是也并不一定。 2黄酮类化合物基本结构中有两个苯环，电子共轭效应比较明显。比较通用的检测波长在250-340之间（一般在280-320左右）。而自然界中具有苯环结构的物质非常之多，具有共轭结构的也数不胜数，有很多物质可以在这个检测范围内有明显吸收峰，不足为奇。靠液相吸收峰检测黄酮，至少在质谱上定性，然后才能用。 3黄酮类化合物的含量，在不同植物之间，不同部位等原因都会不同。而且一般来说，含量都很低。 所以 1更换不同的提取液逐级提取，如果有你重点感兴趣的黄酮类化合物，最好还是只研究感兴趣的。一般植物中有十几，几十种黄酮化合物及其衍生物很正常。 然后对逐级提取液进行分别检测，别忘了跑一下对照，去掉空白对照出现的吸收峰。对了，水提也应该尝试一下。 确定最佳提取条件后，再做后面的分离送样 2用LCMS跑，根据分子量，先定性，看看可能有什么东西，再决定做不做后续实验 别忘了做空白对照 3试验用的量也挺重要的，如果有前人做过类似实验，你最好灵活探索一下最佳用量和取材部位，处理方法。毕竟文章，理解力，实际操作三者之间很难一致。 最后，祝好运。 |
6楼2019-02-14 15:36:16
7楼2019-02-24 11:42:23