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快快乐乐学

新虫 (小有名气)

[求助] 材料经全谱测到了多种黄酮类物质,自己提取的黄酮经高效液相却只... 已有4人参与

材料经全谱测到了多种黄酮类物质,自己提取的黄酮经高效液相却只检测到2种,这是为什么?

我先用石油醚对材料粉末进行了脱脂脱色处理(脱色不完全),再称取1g粉末用70%的甲醇提取酚类物质,经旋蒸浓缩后(不是油膏状,还是液体)用50%的二甲基亚砜(蒸馏水+二甲基亚砜)定容为15mL,直接送去测黄酮,结果只测到了两种,求助前辈们这是我提取的浓度太低了吗,还是有其他什么原因会造成这样?对方要求我重新送样过去,我不知道该怎么再优化了,请求各位大神的指点。

这个是出钱让别人测的,这次测不出来就相当于钱白费了,一般高效液相除了浓度太低检测不出来之外还有会有什么原因?

为什么提取多酚类物质要旋转蒸发浓缩,目的只是增加它的浓度吗,那我在做提取条件优化的时候有好多样需要旋蒸,可以不旋蒸直接定容之后在分光光度计上测吗,一个刚进实验室的童鞋,请求各位帮忙分析一下。 @starseacow

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小松鼠45

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

1黄酮类化合物的溶解性千差万别,基础的黄酮类化合物一般都是溶于甲醇乙醇等简单有机物的,有些也可以溶于油脂等其他高分子有机物中。成苷后一般水溶性会增加,但是也并不一定。
2黄酮类化合物基本结构中有两个苯环,电子共轭效应比较明显。比较通用的检测波长在250-340之间(一般在280-320左右)。而自然界中具有苯环结构的物质非常之多,具有共轭结构的也数不胜数,有很多物质可以在这个检测范围内有明显吸收峰,不足为奇。靠液相吸收峰检测黄酮,至少在质谱上定性,然后才能用。
3黄酮类化合物的含量,在不同植物之间,不同部位等原因都会不同。而且一般来说,含量都很低。
所以
1更换不同的提取液逐级提取,如果有你重点感兴趣的黄酮类化合物,最好还是只研究感兴趣的。一般植物中有十几,几十种黄酮化合物及其衍生物很正常。
然后对逐级提取液进行分别检测,别忘了跑一下对照,去掉空白对照出现的吸收峰。对了,水提也应该尝试一下。
确定最佳提取条件后,再做后面的分离送样
2用LCMS跑,根据分子量,先定性,看看可能有什么东西,再决定做不做后续实验
别忘了做空白对照
3试验用的量也挺重要的,如果有前人做过类似实验,你最好灵活探索一下最佳用量和取材部位,处理方法。毕竟文章,理解力,实际操作三者之间很难一致。
最后,祝好运。
6楼2019-02-14 15:36:16
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wimm36

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼主有没有考虑过,黄酮苷与苷元的极性差别较大,同一种提取方法是不是能够全部提出?
一直生活在别处
2楼2019-01-07 08:26:18
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快快乐乐学

新虫 (小有名气)

这个确实没有考虑过。难道要用不同的溶剂提取吗。 @starseacow

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3楼2019-01-07 09:12:34
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wimm36

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 快快乐乐学 at 2019-01-07 09:12:34
这个确实没有考虑过。难道要用不同的溶剂提取吗。 starseacow

楼主还是多看看植物化学吧
一直生活在别处
4楼2019-01-08 08:10:30
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