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飞走的希望木虫 (著名写手)
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30K的重组质粒，采用top10转化和提取的质粒，用各种内切酶都切不开是什么原因？
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试了好几种酶，都是切不开这个重组质粒，我用自己设计的酶切位点，也是切不开。 但是跑胶时显示的条带位置不一样，只有一条带。正常应该切开很多条带，不知道什么原因？ 我自己查询，分子量较大时可能是紧密型质粒，紧密型质粒如何切开呢？ 我通过电泳发现自己构建的质粒成功了，但是现在不能通过酶切验证，很苦恼。 |
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