24小时热门版块排行榜    

查看: 1216  |  回复: 5

飞走的希望

木虫 (著名写手)

笑的太痴颠

[求助] 30K的重组质粒,采用top10转化和提取的质粒,用各种内切酶都切不开是什么原因?

试了好几种酶,都是切不开这个重组质粒,我用自己设计的酶切位点,也是切不开。

但是跑胶时显示的条带位置不一样,只有一条带。正常应该切开很多条带,不知道什么原因?

我自己查询,分子量较大时可能是紧密型质粒,紧密型质粒如何切开呢?

我通过电泳发现自己构建的质粒成功了,但是现在不能通过酶切验证,很苦恼。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuyuanqing

金虫 (正式写手)

通过电泳能发现你的质粒构建成功?怎么发现的?

发自小木虫Android客户端
2楼2018-12-19 12:52:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飞走的希望

木虫 (著名写手)

笑的太痴颠

引用回帖:
2楼: Originally posted by wuyuanqing at 2018-12-19 12:52:10
通过电泳能发现你的质粒构建成功?怎么发现的?

通过质粒大小和PCR扩增
3楼2018-12-19 13:21:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飞走的希望

木虫 (著名写手)

笑的太痴颠

引用回帖:
2楼: Originally posted by wuyuanqing at 2018-12-19 12:52:10
通过电泳能发现你的质粒构建成功?怎么发现的?

你知道怎么能把他切开吗?我现在的问题是不能通过酶切图谱验证。
4楼2018-12-19 13:22:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

安静de执着14

新虫 (著名写手)

有可能是酶切位点发生变化,导致原有酶切位点不复存在。

发自小木虫Android客户端
5楼2018-12-19 13:30:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (著名写手)

本帖仅楼主可见
6楼2018-12-19 14:13:16
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页
相关版块跳转 我要订阅楼主 飞走的希望 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 5lbyq5wrhb 2026-02-07 4/200 2026-02-08 08:47 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 5lbyq5wrhb 2026-02-07 4/200 2026-02-08 08:46 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 3rkserf6qr 2026-02-07 4/200 2026-02-08 08:27 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +5 2h7du0nuhk 2026-02-07 6/300 2026-02-08 08:26 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +5 2h7du0nuhk 2026-02-07 6/300 2026-02-08 08:12 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 6/300 2026-02-08 08:07 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 08:06 by vs90ilomwc
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 07:52 by vs90ilomwc
[找工作] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 07:46 by vs90ilomwc
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:32 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:27 by vs90ilomwc
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:26 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:07 by vs90ilomwc
[教师之家] 有院领导为了换新车,用横向课题经费买了俩车 +7 瞬息宇宙 2026-02-04 7/350 2026-02-07 21:47 by tfang
[有机交流] 酰胺脱乙酰基 10+5 chibby 2026-02-03 12/600 2026-02-07 19:29 by 江东闲人
[基金申请] 同年申请2项不同项目,第1个项目里不写第2个项目的信息,可以吗 +4 hitsdu 2026-02-06 4/200 2026-02-07 13:07 by jurkat.1640
[基金申请] 有时候真觉得大城市人没有县城人甚至个体户幸福 +9 苏东坡二世 2026-02-04 10/500 2026-02-07 12:37 by 小毛球
[考博] 天津大学招2026.09的博士生,欢迎大家推荐交流(博导是本人) +4 a793625982 2026-02-05 5/250 2026-02-07 10:57 by a793625982
[公派出国] CSC & MSCA 博洛尼亚大学能源材料课题组博士/博士后招生|MSCA经费充足、排名优 +4 雨念 2026-02-01 6/300 2026-02-06 23:32 by MelissaPon
[教师之家] 遇见不省心的家人很难过 +18 otani 2026-02-03 22/1100 2026-02-04 11:06 by tangmnt
信息提示
请填处理意见