应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 专业交流 » 国标16886.5细胞毒性试验相关问题请教！
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 2360  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

wttsjzs

铁虫 (初入文坛)

[求助] 国标16886.5细胞毒性试验相关问题请教！ 已有1人参与

刚接触这个实验，有好几个问题不明白：
1.阳性对照是1%ZDEC（二乙基二硫代氨基甲酸锌），用MEM+10%FBS+1%双抗配制，发现不溶，这个怎么配制呢？能否过滤除菌？阴性对照高密度聚乙烯买的是粉末状的，该怎么配制呢？是否需要买片状的浸提？如果浸提的话，是否可以反复浸提使用呢？
2.材料浸提的时间怎么确定呢？如何选24h 48h 72h？浸提后浸提液加到细胞里继续培养，培养的时间怎么确定呢？我看到国标里有24h和72h，怎么选择呢？
3.国标里写加入MTT后2h即可，但是我看到其他的试验都是推荐加4h，这个有何影响？
请教了！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2018-11-29 16:06:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wttsjzs

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 默默然呢 at 2018-11-30 14:43:03
DMSO浓度为10%，阴性对照我们是重复使用的，超声清洗后湿热灭菌，浸提时间标准里应该写的是不少于24h，浸提72h及MTT培养4h是权威机构推荐使用的时间，不需要验证，延长反应时间是为了反应更完全吧。...

请问你们阴性对照高密度聚乙烯是在哪里买的呢？
赞一下 回复此楼
5楼2018-11-30 15:07:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

默默然呢

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wttsjzs: 金币+5, ★★★很有帮助 2018-11-30 15:08:54
阳性对照一直用的DMSO，阴性对照一般都是用片材按面积浸提，粉末的话可以考虑按重量浸提，浸提时间没有特殊要求通常选用37℃浸提72h，加入浸提液后继续培养24h，MTT培养时间为4h。
赞一下 回复此楼
2楼2018-11-29 17:31:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wttsjzs

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 默默然呢 at 2018-11-29 17:31:39
阳性对照一直用的DMSO，阴性对照一般都是用片材按面积浸提，粉末的话可以考虑按重量浸提，浸提时间没有特殊要求通常选用37℃浸提72h，加入浸提液后继续培养24h，MTT培养时间为4h。

阳性对照DMSO用的浓度是多少呢？阴性对照片材你们是重复使用的吗？怎么清洗灭菌呢？我看到高密度聚乙烯片太贵了。关于浸提和MTT，国标16886.5明确写出是浸提24h,MTT是2h，改变条件的话是不是需要做验证试验证明？
赞一下 回复此楼
3楼2018-11-30 13:54:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

默默然呢

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wttsjzs at 2018-11-30 13:54:09
阳性对照DMSO用的浓度是多少呢？阴性对照片材你们是重复使用的吗？怎么清洗灭菌呢？我看到高密度聚乙烯片太贵了。关于浸提和MTT，国标16886.5明确写出是浸提24h,MTT是2h，改变条件的话是不是需要做验证试验证明？...

DMSO浓度为10%，阴性对照我们是重复使用的，超声清洗后湿热灭菌，浸提时间标准里应该写的是不少于24h，浸提72h及MTT培养4h是权威机构推荐使用的时间，不需要验证，延长反应时间是为了反应更完全吧。
赞一下 回复此楼
4楼2018-11-30 14:43:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 【求调剂】085601材料工程专硕 | 总分272 | +5 脚滑的守法公民 2026-03-27 5/250 2026-03-27 22:50 by lcl13500..
[考研] 291求调剂 +6 孅華 2026-03-22 6/300 2026-03-27 19:56 by WYUMater
[考研] 291求调剂 +12 hhhhxn.. 2026-03-23 18/900 2026-03-27 17:41 by ditto77778
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +7 邱gl 2026-03-27 7/350 2026-03-27 15:27 by Joe率
[考研] 22408 359分调剂 +3 Qshers 2026-03-27 3/150 2026-03-27 12:22 by wxiongid
[考研] 303求调剂 +7 安忆灵 2026-03-22 8/400 2026-03-27 11:46 by sanrepian
[考研] 312求调剂 +9 上岸吧ZJY 2026-03-22 13/650 2026-03-27 11:24 by sanrepian
[考研] 314求调剂 +3 溪云珂 2026-03-26 3/150 2026-03-27 11:20 by sanrepian
[考研] 304材料求调剂 +4 钟llll 2026-03-26 4/200 2026-03-27 03:42 by wxiongid
[考研] 325求调剂 +5 李嘉图·S·路 2026-03-23 5/250 2026-03-27 00:42 by wxiongid
[考研] 294分080500材料科学与工程求调剂 +4 柳溪边 2026-03-26 4/200 2026-03-26 21:14 by XPU李庆
[考研] 求调剂 +5 芦lty 2026-03-25 6/300 2026-03-26 20:49 by 不吃魚的貓
[考研] 321求调剂 +5 材料cailiao 2026-03-21 5/250 2026-03-26 20:41 by fmesaito
[考研] 化学调剂一志愿上海交通大学336分-本科上海211 +4 小鱼爱有机 2026-03-25 4/200 2026-03-26 10:19 by aa331100
[考研] 26考研-291分-厦门大学（085601）-柔性电子学院材料工程专业求调剂 +3 min3 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:22 by xcjcqu
[考研] 求调剂 +3 李李不服输 2026-03-25 3/150 2026-03-25 13:03 by cmz0325
[考研] 086003食品工程求调剂 +6 淼淼111 2026-03-24 6/300 2026-03-25 10:29 by 3Strings
[考研] B区考研调剂 +4 yqdszhdap－ 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:51 by baoball
[考研] 328求调剂 +4 LHHL66 2026-03-23 4/200 2026-03-23 14:55 by lbsjt
[考研] 石河子大学（211、双一流）硕博研究生长期招生公告 +3 李子目 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:01 by 怎么释怀
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭