应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 专业交流 » 国标16886.5细胞毒性试验相关问题请教！
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 2361  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

wttsjzs

铁虫 (初入文坛)

[求助] 国标16886.5细胞毒性试验相关问题请教！ 已有1人参与

刚接触这个实验，有好几个问题不明白：
1.阳性对照是1%ZDEC（二乙基二硫代氨基甲酸锌），用MEM+10%FBS+1%双抗配制，发现不溶，这个怎么配制呢？能否过滤除菌？阴性对照高密度聚乙烯买的是粉末状的，该怎么配制呢？是否需要买片状的浸提？如果浸提的话，是否可以反复浸提使用呢？
2.材料浸提的时间怎么确定呢？如何选24h 48h 72h？浸提后浸提液加到细胞里继续培养，培养的时间怎么确定呢？我看到国标里有24h和72h，怎么选择呢？
3.国标里写加入MTT后2h即可，但是我看到其他的试验都是推荐加4h，这个有何影响？
请教了！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2018-11-29 16:06:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wttsjzs

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 默默然呢 at 2018-11-30 14:43:03
DMSO浓度为10%，阴性对照我们是重复使用的，超声清洗后湿热灭菌，浸提时间标准里应该写的是不少于24h，浸提72h及MTT培养4h是权威机构推荐使用的时间，不需要验证，延长反应时间是为了反应更完全吧。...

请问你们阴性对照高密度聚乙烯是在哪里买的呢？
赞一下 回复此楼
5楼2018-11-30 15:07:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

默默然呢

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wttsjzs: 金币+5, ★★★很有帮助 2018-11-30 15:08:54
阳性对照一直用的DMSO，阴性对照一般都是用片材按面积浸提，粉末的话可以考虑按重量浸提，浸提时间没有特殊要求通常选用37℃浸提72h，加入浸提液后继续培养24h，MTT培养时间为4h。
赞一下 回复此楼
2楼2018-11-29 17:31:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wttsjzs

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 默默然呢 at 2018-11-29 17:31:39
阳性对照一直用的DMSO，阴性对照一般都是用片材按面积浸提，粉末的话可以考虑按重量浸提，浸提时间没有特殊要求通常选用37℃浸提72h，加入浸提液后继续培养24h，MTT培养时间为4h。

阳性对照DMSO用的浓度是多少呢？阴性对照片材你们是重复使用的吗？怎么清洗灭菌呢？我看到高密度聚乙烯片太贵了。关于浸提和MTT，国标16886.5明确写出是浸提24h,MTT是2h，改变条件的话是不是需要做验证试验证明？
赞一下 回复此楼
3楼2018-11-30 13:54:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

默默然呢

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wttsjzs at 2018-11-30 13:54:09
阳性对照DMSO用的浓度是多少呢？阴性对照片材你们是重复使用的吗？怎么清洗灭菌呢？我看到高密度聚乙烯片太贵了。关于浸提和MTT，国标16886.5明确写出是浸提24h,MTT是2h，改变条件的话是不是需要做验证试验证明？...

DMSO浓度为10%，阴性对照我们是重复使用的，超声清洗后湿热灭菌，浸提时间标准里应该写的是不少于24h，浸提72h及MTT培养4h是权威机构推荐使用的时间，不需要验证，延长反应时间是为了反应更完全吧。
赞一下 回复此楼
4楼2018-11-30 14:43:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 321求调剂 +7 璞玉~~ 2026-03-25 8/400 2026-03-29 06:41 by 544594351
[考研] 316求调剂 +7 江辞666 2026-03-26 7/350 2026-03-28 21:28 by sanrepian
[考研] 322求调剂 +7 宋明欣 2026-03-27 7/350 2026-03-28 21:27 by sanrepian
[考研] 食品工程专硕一志愿中海洋309求调剂 +4 小张zxy张 2026-03-26 8/400 2026-03-28 19:25 by lbsjt
[考研] 一志愿华北电力大学能动专硕，293，求调剂 +3 15537177284 2026-03-23 5/250 2026-03-28 16:11 by xxxsssccc
[考研] 一志愿厦门大学化学学硕307求调剂 +10 y7czhao 2026-03-26 10/500 2026-03-28 14:23 by 唐沐儿
[考研] 347求调剂 +3 山顶见α 2026-03-25 3/150 2026-03-28 14:13 by 唐沐儿
[考研] 085701环境工程，267求调剂 +16 minht 2026-03-26 16/800 2026-03-28 12:16 by zllcz
[考研] 291求调剂 +15 hhhhxn.. 2026-03-23 21/1050 2026-03-28 11:26 by self2008
[考研] 085404求调剂，总分309，本科经历较为丰富 +4 来财aa 2026-03-25 4/200 2026-03-28 07:41 by 棒棒球手
[考研] 275求调剂 +10 jjjjjjjjjjl 2026-03-27 10/500 2026-03-27 23:47 by barnett0632
[考研] 265求调剂11408 +3 刘小鹿lu 2026-03-27 3/150 2026-03-27 20:53 by nihaoar
[考研] 316求调剂 +5 Pigcasso 2026-03-24 5/250 2026-03-27 12:10 by zhshch
[考研] 333求调剂 +3 question挽风 2026-03-23 3/150 2026-03-27 11:29 by 不吃魚的貓
[考研] 314求调剂 +3 溪云珂 2026-03-26 3/150 2026-03-27 11:20 by sanrepian
[考研] 327求调剂 +7 prayer13 2026-03-23 7/350 2026-03-26 20:48 by 不吃魚的貓
[考研] 打过很多竞赛，085406控制工程300分，求调剂 +3 askeladz 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:08 by 给你你注意休息
[考研] 296求调剂 +4 汪！？！ 2026-03-25 7/350 2026-03-25 16:41 by 汪！？！
[考研] 一志愿南航材料专317分求调剂 +5 炸呀炸呀炸薯条 2026-03-23 5/250 2026-03-24 16:52 by 星空星月
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境，总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭