应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 专业交流 » 国标16886.5细胞毒性试验相关问题请教！
61/1返回列表
查看: 2535  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wttsjzs

铁虫 (初入文坛)

[求助] 国标16886.5细胞毒性试验相关问题请教！ 已有1人参与

刚接触这个实验，有好几个问题不明白：
1.阳性对照是1%ZDEC（二乙基二硫代氨基甲酸锌），用MEM+10%FBS+1%双抗配制，发现不溶，这个怎么配制呢？能否过滤除菌？阴性对照高密度聚乙烯买的是粉末状的，该怎么配制呢？是否需要买片状的浸提？如果浸提的话，是否可以反复浸提使用呢？
2.材料浸提的时间怎么确定呢？如何选24h 48h 72h？浸提后浸提液加到细胞里继续培养，培养的时间怎么确定呢？我看到国标里有24h和72h，怎么选择呢？
3.国标里写加入MTT后2h即可，但是我看到其他的试验都是推荐加4h，这个有何影响？
请教了！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2018-11-29 16:06:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

默默然呢

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wttsjzs: 金币+5, ★★★很有帮助 2018-11-30 15:08:54
阳性对照一直用的DMSO，阴性对照一般都是用片材按面积浸提，粉末的话可以考虑按重量浸提，浸提时间没有特殊要求通常选用37℃浸提72h，加入浸提液后继续培养24h，MTT培养时间为4h。
赞一下 回复此楼
2楼2018-11-29 17:31:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wttsjzs

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 默默然呢 at 2018-11-29 17:31:39
阳性对照一直用的DMSO，阴性对照一般都是用片材按面积浸提，粉末的话可以考虑按重量浸提，浸提时间没有特殊要求通常选用37℃浸提72h，加入浸提液后继续培养24h，MTT培养时间为4h。

阳性对照DMSO用的浓度是多少呢？阴性对照片材你们是重复使用的吗？怎么清洗灭菌呢？我看到高密度聚乙烯片太贵了。关于浸提和MTT，国标16886.5明确写出是浸提24h,MTT是2h，改变条件的话是不是需要做验证试验证明？
赞一下 回复此楼
3楼2018-11-30 13:54:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

默默然呢

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wttsjzs at 2018-11-30 13:54:09
阳性对照DMSO用的浓度是多少呢？阴性对照片材你们是重复使用的吗？怎么清洗灭菌呢？我看到高密度聚乙烯片太贵了。关于浸提和MTT，国标16886.5明确写出是浸提24h,MTT是2h，改变条件的话是不是需要做验证试验证明？...

DMSO浓度为10%，阴性对照我们是重复使用的，超声清洗后湿热灭菌，浸提时间标准里应该写的是不少于24h，浸提72h及MTT培养4h是权威机构推荐使用的时间，不需要验证，延长反应时间是为了反应更完全吧。
赞一下 回复此楼
4楼2018-11-30 14:43:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wttsjzs

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 默默然呢 at 2018-11-30 14:43:03
DMSO浓度为10%，阴性对照我们是重复使用的，超声清洗后湿热灭菌，浸提时间标准里应该写的是不少于24h，浸提72h及MTT培养4h是权威机构推荐使用的时间，不需要验证，延长反应时间是为了反应更完全吧。...

请问你们阴性对照高密度聚乙烯是在哪里买的呢？
赞一下 回复此楼
5楼2018-11-30 15:07:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

默默然呢

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wttsjzs at 2018-11-30 15:07:55
请问你们阴性对照高密度聚乙烯是在哪里买的呢？...

买的粒料找器械公司压的片
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2018-11-30 15:26:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wttsjzs 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +16 Ldrop2023 2026-08-13 20/1000 2026-08-20 11:07 by xskun
[基金申请] 言之凿凿，8月21号(明天)放榜 +12 医学老男孩 2026-08-20 14/700 2026-08-20 10:53 by ran2233
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +55 医学老男孩 2026-08-13 125/6250 2026-08-20 09:02 by 医学老男孩
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +14 kkkl_v 2026-08-19 15/750 2026-08-20 08:21 by sunzitan
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低？主要原因有哪些？ +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +4 yuleib84 2026-08-19 5/250 2026-08-19 19:52 by hhs666
[基金申请] 今天放榜吗？ +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +10 wangze12014 2026-08-14 12/600 2026-08-19 16:56 by 苦难博士
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 什么时候开奖？ +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭