应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 专业交流 » 国标16886.5细胞毒性试验相关问题请教！
61/1返回列表
查看: 2634  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wttsjzs

铁虫 (初入文坛)

[求助] 国标16886.5细胞毒性试验相关问题请教！ 已有1人参与

刚接触这个实验，有好几个问题不明白：
1.阳性对照是1%ZDEC（二乙基二硫代氨基甲酸锌），用MEM+10%FBS+1%双抗配制，发现不溶，这个怎么配制呢？能否过滤除菌？阴性对照高密度聚乙烯买的是粉末状的，该怎么配制呢？是否需要买片状的浸提？如果浸提的话，是否可以反复浸提使用呢？
2.材料浸提的时间怎么确定呢？如何选24h 48h 72h？浸提后浸提液加到细胞里继续培养，培养的时间怎么确定呢？我看到国标里有24h和72h，怎么选择呢？
3.国标里写加入MTT后2h即可，但是我看到其他的试验都是推荐加4h，这个有何影响？
请教了！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2018-11-29 16:06:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

默默然呢

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wttsjzs: 金币+5, ★★★很有帮助 2018-11-30 15:08:54
阳性对照一直用的DMSO，阴性对照一般都是用片材按面积浸提，粉末的话可以考虑按重量浸提，浸提时间没有特殊要求通常选用37℃浸提72h，加入浸提液后继续培养24h，MTT培养时间为4h。
赞一下 回复此楼
2楼2018-11-29 17:31:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wttsjzs

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 默默然呢 at 2018-11-29 17:31:39
阳性对照一直用的DMSO，阴性对照一般都是用片材按面积浸提，粉末的话可以考虑按重量浸提，浸提时间没有特殊要求通常选用37℃浸提72h，加入浸提液后继续培养24h，MTT培养时间为4h。

阳性对照DMSO用的浓度是多少呢？阴性对照片材你们是重复使用的吗？怎么清洗灭菌呢？我看到高密度聚乙烯片太贵了。关于浸提和MTT，国标16886.5明确写出是浸提24h,MTT是2h，改变条件的话是不是需要做验证试验证明？
赞一下 回复此楼
3楼2018-11-30 13:54:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

默默然呢

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wttsjzs at 2018-11-30 13:54:09
阳性对照DMSO用的浓度是多少呢？阴性对照片材你们是重复使用的吗？怎么清洗灭菌呢？我看到高密度聚乙烯片太贵了。关于浸提和MTT，国标16886.5明确写出是浸提24h,MTT是2h，改变条件的话是不是需要做验证试验证明？...

DMSO浓度为10%，阴性对照我们是重复使用的，超声清洗后湿热灭菌，浸提时间标准里应该写的是不少于24h，浸提72h及MTT培养4h是权威机构推荐使用的时间，不需要验证，延长反应时间是为了反应更完全吧。
赞一下 回复此楼
4楼2018-11-30 14:43:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wttsjzs

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 默默然呢 at 2018-11-30 14:43:03
DMSO浓度为10%，阴性对照我们是重复使用的，超声清洗后湿热灭菌，浸提时间标准里应该写的是不少于24h，浸提72h及MTT培养4h是权威机构推荐使用的时间，不需要验证，延长反应时间是为了反应更完全吧。...

请问你们阴性对照高密度聚乙烯是在哪里买的呢？
赞一下 回复此楼
5楼2018-11-30 15:07:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

默默然呢

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wttsjzs at 2018-11-30 15:07:55
请问你们阴性对照高密度聚乙烯是在哪里买的呢？...

买的粒料找器械公司压的片
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2018-11-30 15:26:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wttsjzs 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 FChKX8meu1ds 2026-11-09 8/400 2026-11-11 01:49 by Z7qfCsdIiD1T
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 5/250 2026-11-11 01:24 by Z7qfCsdIiD1T
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 6/300 2026-11-11 01:10 by Z7qfCsdIiD1T
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 5/250 2026-11-11 01:04 by Z7qfCsdIiD1T
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 6/300 2026-11-11 01:02 by Z7qfCsdIiD1T
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 4/200 2026-11-10 21:02 by Z7qfCsdIiD1T
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 4/200 2026-11-10 20:51 by Z7qfCsdIiD1T
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 5/250 2026-11-10 20:18 by Z7qfCsdIiD1T
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 5/250 2026-11-10 20:12 by Z7qfCsdIiD1T
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 4/200 2026-11-10 19:39 by Z7qfCsdIiD1T
[考博] 申请环境，微生物方向博士 +3 浅笑09 2026-11-08 3/150 2026-11-10 12:44 by 可淡不可忘
[教师之家] 延安大学回应“副教授留绝笔信”：确已离世，正核实举报内容 +4 yexuqing 2026-11-04 6/300 2026-11-10 11:13 by susizheng
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 4/200 2026-11-10 01:29 by FChKX8meu1ds
[考博] 27博士申请 +3 白白白ly 2026-11-09 3/150 2026-11-09 21:39 by szq0819
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 15/750 2026-11-09 13:19 by Equinoxhua
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 15/750 2026-11-09 11:41 by GwrQVVR6Oenx
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 16/800 2026-11-06 05:00 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:53 by qL1cU46YIdK0
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭