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神秘园

金虫 (初入文坛)

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[交流] 酶切回收问题

请问各位，我做酶切之后能不能50℃加热使酶失活，然后直接用于后续试验？我后面还要做连接可不可以？
我的回收效率太低了。。。不知道是不是我操作的问题，用的天泽的试剂盒~
回收时有啥需要注意的各位也可以给我建议一下~谢了~

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1楼 2009-04-21 08:22:19

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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖甜到憂傷

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不回收灭活直接做后续试验没试过。
回收的一些小细节：
1，TAE新配，回收胶现做现用。（电泳缓冲液当然也应该是新的了）
2，切胶尽量切掉没有亮带的部分可以提高回收率。（可尽量把胶做厚，点样孔做窄，这样容易切掉没亮带部分）
3，最后加洗脱液可以将洗脱液体积减小，重复洗脱一次也可加大回收率。
4，不要用台式离心机，用好点的离心机，转速和时间控制上会准确点。