应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 酶切回收问题
91/1返回列表
查看: 1539  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

神秘园

金虫 (初入文坛)

[交流] 酶切回收问题

请问各位，我做酶切之后能不能50℃加热使酶失活，然后直接用于后续试验？我后面还要做连接可不可以？
我的回收效率太低了。。。不知道是不是我操作的问题，用的天泽的试剂盒~
回收时有啥需要注意的各位也可以给我建议一下~谢了~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2009-04-21 08:22:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anik

银虫 (正式写手)
★
sutao1979(金币+1,VIP+0):thank you for participation 4-21 15:01
可以不用灭活直接用于后续试验，但如果你不放心的话可以热激灭活。
回收效率低，一直是个比较头疼的问题。这里面每个步骤不一定非按照他的说明书上来做，可以根据你自身的具体情况来定。
我以前是用玻璃奶回收的，效果比试剂盒要好，而且速度也不比试剂盒来的慢。
赞一下(6人) 回复此楼
2楼2009-04-21 08:28:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

神秘园

金虫 (初入文坛)
谢谢ls~继续坐等其他高手的解答~嘿嘿~
赞一下 回复此楼
3楼2009-04-21 08:39:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
sutao1979(金币+1,VIP+0):thank you 4-21 15:01
国产试剂盒回收率就是低
灭活之后，如果连接体系中，酶切产物的体积比较大，还是会影响连接的
你可以考虑进口的试剂盒嘛……
赞一下(6人) 回复此楼
4楼2009-04-21 08:44:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

神秘园

金虫 (初入文坛)
5.4kb质粒，单酶切~大么？
进口的？穷学校，米钱。。。
赞一下 回复此楼
5楼2009-04-21 08:58:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
不回收灭活直接做后续试验没试过。
回收的一些小细节：
1，TAE新配，回收胶现做现用。（电泳缓冲液当然也应该是新的了）
2，切胶尽量切掉没有亮带的部分可以提高回收率。（可尽量把胶做厚，点样孔做窄，这样容易切掉没亮带部分）
3，最后加洗脱液可以将洗脱液体积减小，重复洗脱一次也可加大回收率。
4，不要用台式离心机，用好点的离心机，转速和时间控制上会准确点。
赞一下 回复此楼
Thank-you，so-blue.
6楼2009-04-21 09:41:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

神秘园

金虫 (初入文坛)
好的，谢谢ls~
我不只PCR回收，就连质粒酶切回收效率也不高
赞一下 回复此楼
7楼2009-04-21 09:44:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

菊花茶

木虫 (著名写手)
占个位置，学习学习
赞一下 回复此楼
8楼2009-04-21 09:47:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

buffoon_1985

银虫 (小有名气)
共同学习~
我是lz，换回自己号啦~
刚刚自己电脑不能上网。。。
赞一下 回复此楼
9楼2009-04-21 09:52:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 神秘园 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 275求调剂 +3 Micky11223 2026-03-25 4/200 2026-03-25 19:51 by 莫xiao
[考研] 07化学303求调剂 +4 睿08 2026-03-25 4/200 2026-03-25 19:15 by qingfeng258
[考研] 考研调剂 +5 来好运来来来 2026-03-21 6/300 2026-03-25 18:53 by 来好运来来来
[考研] 考研调剂 +5 呼呼？~+123456 2026-03-24 5/250 2026-03-25 18:15 by xcjcqu
[考研] 333求调剂 +6 87639 2026-03-21 11/550 2026-03-25 16:17 by 87639
[考研] 材料与化工考研调剂 +9 孅華 2026-03-22 9/450 2026-03-25 13:09 by cmz0325
[考研] 281求调剂 +4 Koxui 2026-03-24 5/250 2026-03-25 11:38 by userper
[考研] 086003食品工程求调剂 +6 淼淼111 2026-03-24 6/300 2026-03-25 10:29 by 3Strings
[考研] 0856材料专硕353求调剂 +6 NIFFFfff 2026-03-20 6/300 2026-03-24 21:02 by hello七七
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +10 纸鱼ly 2026-03-21 11/550 2026-03-24 17:22 by qingfeng258
[考研] 279分求调剂 一志愿211 +18 chaojifeixia 2026-03-19 20/1000 2026-03-24 10:34 by dolphin_ycj
[考研] 384求调剂 +3 子系博 2026-03-22 6/300 2026-03-23 21:45 by 子系博
[考研] 336求调剂 +4 收到VS 2026-03-20 4/200 2026-03-23 19:02 by macy2011
[考研] 一志愿上海交大生物与医药专硕324分，求调剂 +5 jiajunX 2026-03-22 5/250 2026-03-23 18:07 by YMU施老师
[考研] 一志愿华中农业071010，总分320求调剂 +5 困困困困坤坤 2026-03-20 6/300 2026-03-22 17:41 by hxsm
[考研] 寻找调剂 +4 倔强芒? 2026-03-21 4/200 2026-03-22 16:14 by 木托莫露露
[考研] 求调剂 +3 .m.. 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:25 by barlinike
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭