应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 酶切回收问题
91/1返回列表
查看: 1524  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

神秘园

金虫 (初入文坛)

[交流] 酶切回收问题

请问各位，我做酶切之后能不能50℃加热使酶失活，然后直接用于后续试验？我后面还要做连接可不可以？
我的回收效率太低了。。。不知道是不是我操作的问题，用的天泽的试剂盒~
回收时有啥需要注意的各位也可以给我建议一下~谢了~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2009-04-21 08:22:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anik

银虫 (正式写手)
★
sutao1979(金币+1,VIP+0):thank you for participation 4-21 15:01
可以不用灭活直接用于后续试验，但如果你不放心的话可以热激灭活。
回收效率低，一直是个比较头疼的问题。这里面每个步骤不一定非按照他的说明书上来做，可以根据你自身的具体情况来定。
我以前是用玻璃奶回收的，效果比试剂盒要好，而且速度也不比试剂盒来的慢。
赞一下(6人) 回复此楼
2楼2009-04-21 08:28:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

神秘园

金虫 (初入文坛)
谢谢ls~继续坐等其他高手的解答~嘿嘿~
赞一下 回复此楼
3楼2009-04-21 08:39:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
sutao1979(金币+1,VIP+0):thank you 4-21 15:01
国产试剂盒回收率就是低
灭活之后，如果连接体系中，酶切产物的体积比较大，还是会影响连接的
你可以考虑进口的试剂盒嘛……
赞一下(6人) 回复此楼
4楼2009-04-21 08:44:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

神秘园

金虫 (初入文坛)
5.4kb质粒，单酶切~大么？
进口的？穷学校，米钱。。。
赞一下 回复此楼
5楼2009-04-21 08:58:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
不回收灭活直接做后续试验没试过。
回收的一些小细节：
1，TAE新配，回收胶现做现用。（电泳缓冲液当然也应该是新的了）
2，切胶尽量切掉没有亮带的部分可以提高回收率。（可尽量把胶做厚，点样孔做窄，这样容易切掉没亮带部分）
3，最后加洗脱液可以将洗脱液体积减小，重复洗脱一次也可加大回收率。
4，不要用台式离心机，用好点的离心机，转速和时间控制上会准确点。
赞一下 回复此楼
Thank-you，so-blue.
6楼2009-04-21 09:41:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

神秘园

金虫 (初入文坛)
好的，谢谢ls~
我不只PCR回收，就连质粒酶切回收效率也不高
赞一下 回复此楼
7楼2009-04-21 09:44:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

菊花茶

木虫 (著名写手)
占个位置，学习学习
赞一下 回复此楼
8楼2009-04-21 09:47:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

buffoon_1985

银虫 (小有名气)
共同学习~
我是lz，换回自己号啦~
刚刚自己电脑不能上网。。。
赞一下 回复此楼
9楼2009-04-21 09:52:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 神秘园 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0856化工专硕求调剂 +8 董boxing 2026-03-01 8/400 2026-03-01 16:49 by caszguilin
[考研] 材料学硕318求调剂 +8 February_Feb 2026-03-01 10/500 2026-03-01 16:48 by sunny81
[基金申请] 刚录用，没有期刊号，但是在线可看的论文可以放为代表作吗 10+3 arang1 2026-03-01 3/150 2026-03-01 16:43 by babero
[考研] 313求调剂 +3 水流年lc 2026-02-28 3/150 2026-03-01 16:01 by 新能源达人
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-02-28 7/350 2026-03-01 15:14 by wjLi2017
[考研] 材料工程274求调剂 +3 Lilithan 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:58 by ms629
[考研] 295复试调剂 +3 简木ChuFront 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:27 by zzxw520th
[考研] 298求调剂 +9 人间唯你是清欢 2026-02-28 12/600 2026-03-01 14:23 by Ducount.Y
[考研] 291分工科求调剂 +8 science饿饿 2026-03-01 9/450 2026-03-01 14:22 by Ducount.Y
[考研] 材料学调剂 +8 提神豆沙包 2026-02-28 10/500 2026-03-01 14:14 by peike
[考研] 0856材料求调剂 +3 麻辣鱿鱼 2026-02-28 3/150 2026-03-01 14:06 by yc258
[考研] 化工299分求调剂 一志愿985落榜 +4 嘻嘻(*^ω^*) 2026-03-01 4/200 2026-03-01 13:15 by wang_dand
[考研] 306分材料调剂 +3 chuanzhu川烛 2026-03-01 4/200 2026-03-01 12:32 by houyaoxu
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
[考研] 材料类求调剂 +8 wana_kiko 2026-02-28 8/400 2026-03-01 11:44 by 王伟要上岸啊
[考研] 材料调剂 +4 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 4/200 2026-03-01 00:38 by 猫猫球alter
[考研] 304求调剂 +3 52hz~~ 2026-02-28 5/250 2026-03-01 00:00 by 52hz~~
[考博] 26申博 +4 想申博！ 2026-02-26 4/200 2026-02-28 21:37 by limorning
[考研] 264求调剂 +3 巴拉巴拉根556 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:31 by gaoxiaoniuma
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +4 礼堂丁真258 2026-02-28 6/300 2026-02-28 16:18 by 求调剂zz
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭