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神秘园

金虫 (初入文坛)

[交流] 酶切回收问题

请问各位,我做酶切之后能不能50℃加热使酶失活,然后直接用于后续试验?我后面还要做连接可不可以?
我的回收效率太低了。。。不知道是不是我操作的问题,用的天泽的试剂盒~
回收时有啥需要注意的各位也可以给我建议一下~谢了~
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


sutao1979(金币+1,VIP+0):thank you 4-21 15:01
国产试剂盒回收率就是低
灭活之后,如果连接体系中,酶切产物的体积比较大,还是会影响连接的
你可以考虑进口的试剂盒嘛……
4楼2009-04-21 08:44:32
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anik

银虫 (正式写手)


sutao1979(金币+1,VIP+0):thank you for participation 4-21 15:01
可以不用灭活直接用于后续试验,但如果你不放心的话可以热激灭活。
回收效率低,一直是个比较头疼的问题。这里面每个步骤不一定非按照他的说明书上来做,可以根据你自身的具体情况来定。
我以前是用玻璃奶回收的,效果比试剂盒要好,而且速度也不比试剂盒来的慢。
2楼2009-04-21 08:28:22
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神秘园

金虫 (初入文坛)

谢谢ls~继续坐等其他高手的解答~嘿嘿~
3楼2009-04-21 08:39:33
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神秘园

金虫 (初入文坛)

5.4kb质粒,单酶切~大么?
进口的?穷学校,米钱。。。
5楼2009-04-21 08:58:25
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