| 查看: 1007 | 回复: 6 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
hxp207木虫 (著名写手)
|
[交流]
【求助】IgG 浓度的测定(已解决)
|
||
|
我在sigma买的human IgG，powder。老板让测一下它的浓度。 我用醋酸钠溶液重构成1mg/ml的溶液，说明书中说是E（280，1%）=14，即在280nm的波长下消光系数为14，我测得的浓度却为0.1mg/ml,稀释成50ug/ml 的IgG测得的浓度为5ug/ml，不明白为什么总是差10倍。 我用的仪器是岛津公司的biospec-mini分光光度仪。 请有经验的同学指教，谢谢！ [ Last edited by hxp207 on 2009-5-26 at 03:14 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
分享一款实验室长期在用的 TEV 蛋白酶，蛋白纯化党可以参考下
已经有1人回复
-
这些Scopus收录的英文国际期刊正在征稿（快速审稿）2026年底前免APC！
已经有12人回复
-
生物力学与组织工程学论文润色/翻译怎么收费?
已经有138人回复
-
做mRNA体外加帽，Cap0转Cap1效率不稳？分享一款2´-O甲基转移酶实测感受
已经有0人回复
-
美国南加大(USC)药学院Prof. Yong (Tiger) Zhang课题组诚聘博士后
已经有3人回复
-
反应产物总提不上量？聊聊无机焦磷酸酶在核酸合成里的实用价值
已经有0人回复
-
【经验分享】体外转录踩坑无数，挖到一款好用的国产 T7 RNA 聚合酶
已经有0人回复
-
体外转录 / PCR 总提不上产量？终于找到稳定好用的无机焦磷酸酶
已经有5人回复
-
[会议预告]2026生物医药产业发展大会
已经有0人回复
heismeng
金虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 898.1
- 散金: 38
- 帖子: 265
- 在线: 24.9小时
- 虫号: 316216
- 注册: 2007-03-03
- 性别: GG
- 专业: 免疫生物学
6楼2009-04-20 12:05:31
wgcui
铁杆木虫 (著名写手)
- BM-EPI: 1
- 应助: 4 (幼儿园)
- 贵宾: 0.761
- 金币: 5432.6
- 散金: 215
- 红花: 10
- 帖子: 1909
- 在线: 367.1小时
- 虫号: 363914
- 注册: 2007-05-07
- 性别: GG
- 专业: 生物医用高分子材料
★
yusen_1982(金币+0,VIP+0):欢迎讨论 4-15 10:52
hxp207(金币+1,VIP+0):能说具体些么，会不会在操作过程中哪个参数不对？谢谢。 4-15 10:59
yusen_1982(金币+0,VIP+0):欢迎讨论 4-15 10:52
hxp207(金币+1,VIP+0):能说具体些么，会不会在操作过程中哪个参数不对？谢谢。 4-15 10:59
| 做个标准线看看。 |
2楼2009-04-15 08:34:54
yzhuang
金虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 3627.9
- 帖子: 199
- 在线: 186.6小时
- 虫号: 315187
- 注册: 2007-02-26
- 性别: GG
- 专业: 生物医用高分子材料
3楼2009-04-16 23:47:14
winter_gates
金虫 (正式写手)
生命过客
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1161.8
- 散金: 100
- 红花: 1
- 帖子: 615
- 在线: 20.4小时
- 虫号: 541629
- 注册: 2008-04-08
- 专业: 生物化学
★ ★
hxp207(金币+2,VIP+0):我倒没有迷信机器的能力，关键是老板非让做个浓度，我只能照做了，另外，因为我要把IgG修饰要一个基底表面，所以浓度还是很重要的，谢谢你的回答 4-19 02:27
hxp207(金币+2,VIP+0):我倒没有迷信机器的能力，关键是老板非让做个浓度，我只能照做了，另外，因为我要把IgG修饰要一个基底表面，所以浓度还是很重要的，谢谢你的回答 4-19 02:27
|
对于较低浓度和较高浓度的蛋白，用280nm吸收测定的并不准确。实际上没有很好的办法精确测定低浓度的蛋白浓度。 我曾经做过BSA的浓度梯度的280nm光吸收的标准曲线，在100ug/ml-1mg/ml的测定相对可信，超出范围后就不是线性关系。楼主有点迷信机器的能力了。 给的是粉末，那就可以直接按照比例溶解，根本不必要测定浓度，稀释就好了。生物实验对这种东西要求没有那么严=。= |
4楼2009-04-18 22:07:36
