应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 考马斯亮蓝测蛋白浓度问题
111/2返回列表12下一页
查看: 937  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

206206206206

新虫 (正式写手)

[交流] 考马斯亮蓝测蛋白浓度问题

在用考马斯亮蓝法测超氧化物歧化酶（SOD）的浓度出现问题：
比方说我称20mg的SOD，溶解于pH7.8  25mmol/L Tris-Hcl中然后取一定体积去测蛋白浓度，再通过标曲去计算SOD的重量，计算出来的数字是15-16mg左右，几乎每次都是这样。
重新配制过考马斯亮蓝，重新做标曲，但还是一样差不多就那么个结果！无法理解！
请各位朋友帮忙分析分析，谢谢！

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-5 at 20:11 ]
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-04-04 15:53:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanghao2900

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
reasonspare(金币+3,VIP+0):积极交流奖 4-5 18:39
第一，标准曲线线性相关度高吗？
第二，考马斯亮蓝配置的时候是否经过过滤操作？如果有颗粒悬浮的话，会造成被吸收光的衍射，从而降低吸光值。
赞一下(10人) 回复此楼
2楼2009-04-04 19:34:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaocy8903

木虫 (知名作家)
标曲用的是什么蛋白
赞一下 回复此楼
3楼2009-04-04 21:47:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

206206206206

新虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by wanghao2900 at 2009-4-4 19:34:
第一，标准曲线线性相关度高吗？
第二，考马斯亮蓝配置的时候是否经过过滤操作？如果有颗粒悬浮的话，会造成被吸收光的衍射，从而降低吸光值。

0.995-0.999不等啊   应该还可以啊！
配制好了我过滤了呀！
赞一下 回复此楼
4楼2009-04-04 23:45:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

206206206206

新虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by zhaocy8903 at 2009-4-4 21:47:
标曲用的是什么蛋白

牛血清白蛋白
回复此楼
5楼2009-04-04 23:46:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaocy8903

木虫 (知名作家)
★
reasonspare(金币+1,VIP+0):积极交流奖 4-5 18:40
那就很正常了，不同蛋白的吸光度是不一样的
试试LOWRY或BCA法吧
赞一下(10人) 回复此楼
6楼2009-04-05 08:49:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanghao2900

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 206206206206 at 2009-4-4 23:45:

0.995-0.999不等啊   应该还可以啊！
配制好了我过滤了呀！

线性相关度很高啊，你查查考马斯亮蓝的测蛋白的检测限是多少呢？
赞一下 回复此楼
7楼2009-04-05 22:44:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaocy8903

木虫 (知名作家)
考马斯亮蓝G-250在酸性溶液中为棕红色当它与蛋白质通过范德华键结合后变为蓝色且在蛋白质一定浓度范围内符合比尔定律可在595nm处比色测定2 5分钟即呈最大光吸收至少稳定1小时该法操作简便迅速消耗样品量少但不同蛋白质之间差异大且标准曲线线性差高浓度的Tris EDTA 尿素甘油蔗糖丙酮硫酸铵和去污剂对测定有干扰缓冲液浓度过高时改变测定液pH值会影响显色考马斯亮蓝染色能力强比色杯不洗干净会影响光吸收值不可用石英杯测定。

不同蛋白质之间差异大
赞一下 回复此楼
8楼2009-04-06 10:04:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aga0110125

银虫 (小有名气)
考马斯亮蓝检测蛋白很不稳定，我以前做每次结果都不一样
赞一下 回复此楼
9楼2009-04-07 14:58:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
可以尝试换成BCA法去测
赞一下 回复此楼
10楼2009-04-07 17:14:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 206206206206 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 欢迎采矿、地质、岩土、计算机、人工智能等专业的同学报考 +3 pin8023 2026-02-28 5/250 2026-03-02 00:24 by 花YOU重开日
[考研] 材料复试调剂 +3 学材料的点 2026-03-01 4/200 2026-03-02 00:07 by ccp273206157
[基金申请] 本子写完了，给DS兄弟看了，得了92分 +3 Doma 2026-03-01 7/350 2026-03-02 00:00 by jnzsy
[考研] 一志愿郑大材料学硕298分，求调剂 +5 wsl111 2026-03-01 5/250 2026-03-01 23:45 by 暮雨星晴
[考研] 275求调剂 +3 明远求学 2026-03-01 3/150 2026-03-01 22:29 by 刘兵
[考研] 26考研报考西工大材料308分求调剂 +3 weizhong123 2026-03-01 3/150 2026-03-01 21:42 by 公瑾逍遥
[考研] 272求调剂 +6 田智友 2026-02-28 6/300 2026-03-01 21:40 by 公瑾逍遥
[考研] 0856求调剂285 +10 吕仔龙 2026-02-28 10/500 2026-03-01 21:37 by 公瑾逍遥
[考研] 272求调剂 +6 材紫有化 2026-02-28 6/300 2026-03-01 18:58 by 18137688336
[考研] 291分工科求调剂 +9 science饿饿 2026-03-01 10/500 2026-03-01 18:55 by 18137688336
[考研] 328求调剂 +3 aaadim 2026-03-01 5/250 2026-03-01 17:29 by njzyff
[考研] 化工专硕348，一志愿985求调剂 +5 弗格个 2026-02-28 8/400 2026-03-01 17:25 by sunny81
[考研] 303求调剂 +4 今夏不夏 2026-03-01 4/200 2026-03-01 14:46 by 嘟嘟小浣熊
[考研] 寻找调剂 +4 LYidhsjabdj 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:56 by sunny81
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业，申博 +3 更多的是 2026-02-27 4/200 2026-03-01 10:04 by ztg729
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧？ +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 264求调剂 +3 巴拉巴拉根556 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:31 by gaoxiaoniuma
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭