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新虫 (正式写手)

[交流] 考马斯亮蓝测蛋白浓度问题

在用考马斯亮蓝法测超氧化物歧化酶(SOD)的浓度出现问题:
比方说我称20mg的SOD,溶解于pH7.8  25mmol/L Tris-Hcl中然后取一定体积去测蛋白浓度,再通过标曲去计算SOD的重量,计算出来的数字是15-16mg左右,几乎每次都是这样。
重新配制过考马斯亮蓝,重新做标曲,但还是一样差不多就那么个结果!无法理解!
请各位朋友帮忙分析分析,谢谢!

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-5 at 20:11 ]
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206206206206

新虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by wanghao2900 at 2009-4-4 19:34:
第一,标准曲线线性相关度高吗?
第二,考马斯亮蓝配置的时候是否经过过滤操作?如果有颗粒悬浮的话,会造成被吸收光的衍射,从而降低吸光值。

0.995-0.999不等啊   应该还可以啊!
配制好了我过滤了呀!
4楼2009-04-04 23:45:47
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wanghao2900

银虫 (小有名气)

★ ★ ★
reasonspare(金币+3,VIP+0):积极交流奖 4-5 18:39
第一,标准曲线线性相关度高吗?
第二,考马斯亮蓝配置的时候是否经过过滤操作?如果有颗粒悬浮的话,会造成被吸收光的衍射,从而降低吸光值。
2楼2009-04-04 19:34:21
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)

标曲用的是什么蛋白
3楼2009-04-04 21:47:28
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206206206206

新虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by zhaocy8903 at 2009-4-4 21:47:
标曲用的是什么蛋白

牛血清白蛋白
5楼2009-04-04 23:46:04
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