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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » pcr产物跑胶
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18838517524

新虫 (小有名气)

[交流] pcr产物跑胶 已有2人参与

步骤完整正确，做了两个基因，可它们pcr产物跑胶就是不出来，只有maker，为什么？

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1楼 2018-07-23 00:21:46
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木元雨

木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
有没有阳性对照？

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2楼2018-07-23 01:55:19
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18838517524

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 木元雨 at 2018-07-23 01:55:19
有没有阳性对照？

maker不就是阳性对照么

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3楼2018-07-23 17:07:09
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木元雨

木虫 (职业作家)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-07-23 22:21:18
maker不是阳性对照。只是一个大小参考条带。你现在的目的是要把基因扩出来，还是要检测有没有这个基因？

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4楼2018-07-23 18:22:25
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18838517524

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 木元雨 at 2018-07-23 18:22:25
maker不是阳性对照。只是一个大小参考条带。你现在的目的是要把基因扩出来，还是要检测有没有这个基因？

把基因扩增出来 是不是退火温度不合适？

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5楼2018-07-23 23:47:16
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木元雨

木虫 (职业作家)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流 2018-07-24 12:06:36
引用回帖:
5楼: Originally posted by 18838517524 at 2018-07-23 23:47:16
把基因扩增出来 是不是退火温度不合适？
...

第一步，你要确定你用来扩增目的基因的模板，是没有问题的；第二步，确实可以试一下低退火温度，温度低了，特异性不高，但是扩增出来的可能性会提高；第三个，检查一下酶，和酶的扩增长度，扩增效率，以及循环次数等；第四个，也有可能是引物，毕竟扩基因的引物，不一定好。

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6楼2018-07-24 00:52:57
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18838517524

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 木元雨 at 2018-07-24 00:52:57
第一步，你要确定你用来扩增目的基因的模板，是没有问题的；第二步，确实可以试一下低退火温度，温度低了，特异性不高，但是扩增出来的可能性会提高；第三个，检查一下酶，和酶的扩增长度，扩增效率，以及循环次数 ...

好 谢谢

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7楼2018-07-24 09:41:32
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xuyuzhi

新虫 (正式写手)
一道生物支持你
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17343151072目前在一道生物，常联系
8楼2018-07-26 16:49:50
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