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18838517524

新虫 (小有名气)

[交流] pcr产物跑胶 已有2人参与

步骤完整正确,做了两个基因,可它们pcr产物跑胶就是不出来,只有maker,为什么?

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木元雨

木虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
有没有阳性对照?

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2楼2018-07-23 01:55:19
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18838517524

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 木元雨 at 2018-07-23 01:55:19
有没有阳性对照?

maker不就是阳性对照么

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3楼2018-07-23 17:07:09
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木元雨

木虫 (职业作家)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-07-23 22:21:18
maker不是阳性对照。只是一个大小参考条带。你现在的目的是要把基因扩出来,还是要检测有没有这个基因?

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4楼2018-07-23 18:22:25
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18838517524

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 木元雨 at 2018-07-23 18:22:25
maker不是阳性对照。只是一个大小参考条带。你现在的目的是要把基因扩出来,还是要检测有没有这个基因?

把基因扩增出来 是不是退火温度不合适?

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5楼2018-07-23 23:47:16
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木元雨

木虫 (职业作家)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流 2018-07-24 12:06:36
引用回帖:
5楼: Originally posted by 18838517524 at 2018-07-23 23:47:16
把基因扩增出来 是不是退火温度不合适?
...

第一步,你要确定你用来扩增目的基因的模板,是没有问题的;第二步,确实可以试一下低退火温度,温度低了,特异性不高,但是扩增出来的可能性会提高;第三个,检查一下酶,和酶的扩增长度,扩增效率,以及循环次数等;第四个,也有可能是引物,毕竟扩基因的引物,不一定好。

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6楼2018-07-24 00:52:57
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18838517524

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 木元雨 at 2018-07-24 00:52:57
第一步,你要确定你用来扩增目的基因的模板,是没有问题的;第二步,确实可以试一下低退火温度,温度低了,特异性不高,但是扩增出来的可能性会提高;第三个,检查一下酶,和酶的扩增长度,扩增效率,以及循环次数 ...

好 谢谢

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7楼2018-07-24 09:41:32
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xuyuzhi

新虫 (正式写手)

一道生物支持你
17343151072目前在一道生物,常联系
8楼2018-07-26 16:49:50
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