应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 就问大神们，原核表达在上清里，然后要咋验证生物活性呀
51/1返回列表
查看: 1627  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

草哥cium

新虫 (正式写手)

[求助] 就问大神们，原核表达在上清里，然后要咋验证生物活性呀 已有2人参与

大神们我有一个问题，我总感觉自己氨基酸序列有突变，因为当初用的tap酶扩增的549bp片段用来做表达，不过也表达出来了，还在上清。所以想问问大神们，是不是一般要是氨基酸序列不太对是不会表达或者表达在上清的哇，一般都是咋验证蛋白质是不是有生物活性呀。。

@hc-material 发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2018-05-30 20:23:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

863828916

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 草哥cium at 2018-05-30 21:52:33
大神，是不是基本上 上清表达了就是蛋白质正确折叠了，就是有活性的哇。。。只是要是氨基酸突变了，可能活性改变了?  本人菜鸟
...

在上清说明蛋白折叠可以，但是突变的话不一定会导致蛋白不正确折叠。氨基酸突变也不一定会导致活性丧尸，若突变发生在活性中心就可能会导致失活。所以你直接把蛋白提取出来直接先测活咯

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2018-05-30 22:26:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

863828916

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
突没突变直接测个序不就知道了啊？
赞一下 回复此楼
2楼2018-05-30 20:53:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

草哥cium

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 863828916 at 2018-05-30 20:53:20
突没突变直接测个序不就知道了啊？

ncbi..上没我这个序列。。第一个做的 没办法比对哇

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2018-05-30 21:29:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

863828916

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 草哥cium at 2018-05-30 21:29:24
ncbi..上没我这个序列。。第一个做的 没办法比对哇
...

蛋白序列也不知道吗？实验室没有高保真酶？
氨基酸突变的话有可能会导致蛋白不再上清，也有可能导致蛋白失活，但是这个不是绝对的。好多氨基酸突变了蛋白仍然表达，仍然有活性。so你直接把表达的蛋白用亲和柱提取出来直接测活性吧，毕竟活性好的话还管他图没突变
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

草哥cium
4楼2018-05-30 21:38:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 24/1200 2026-08-16 10:16 by 启萌科技
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +7 Ldrop2023 2026-08-13 7/350 2026-08-15 15:57 by mzhh2000
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥？ +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭