24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1382  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

草哥cium

新虫 (正式写手)

[求助] 就问大神们,原核表达在上清里,然后要咋验证生物活性呀 已有2人参与

大神们我有一个问题,我总感觉自己氨基酸序列有突变,因为当初用的tap酶扩增的549bp片段用来做表达,不过也表达出来了,还在上清。所以想问问大神们,是不是一般要是氨基酸序列不太对是不会表达或者表达在上清的哇,一般都是咋验证蛋白质是不是有生物活性呀。。

@hc-material 发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

863828916

金虫 (正式写手)


引用回帖:
5楼: Originally posted by 草哥cium at 2018-05-30 21:52:33
大神,是不是基本上 上清表达了就是蛋白质正确折叠了,就是有活性的哇。。。只是要是氨基酸突变了,可能活性改变了?  本人菜鸟
...

在上清说明蛋白折叠可以,但是突变的话不一定会导致蛋白不正确折叠。氨基酸突变也不一定会导致活性丧尸,若突变发生在活性中心就可能会导致失活。所以你直接把蛋白提取出来直接先测活咯

发自小木虫Android客户端
8楼2018-05-30 22:26:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

863828916

金虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
突没突变直接测个序不就知道了啊?
2楼2018-05-30 20:53:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

草哥cium

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 863828916 at 2018-05-30 20:53:20
突没突变直接测个序不就知道了啊?

ncbi..上没我这个序列。。第一个做的 没办法比对哇

发自小木虫Android客户端
3楼2018-05-30 21:29:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

863828916

金虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 草哥cium at 2018-05-30 21:29:24
ncbi..上没我这个序列。。第一个做的 没办法比对哇
...

蛋白序列也不知道吗?实验室没有高保真酶?
氨基酸突变的话有可能会导致蛋白不再上清,也有可能导致蛋白失活,但是这个不是绝对的。好多氨基酸突变了蛋白仍然表达,仍然有活性。so你直接把表达的蛋白用亲和柱提取出来直接测活性吧,毕竟活性好的话还管他图没突变

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2018-05-30 21:38:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 329求调剂 +6 星野? 2026-03-26 6/300 2026-03-28 14:14 by 唐沐儿
[考研] 347求调剂 +3 山顶见α 2026-03-25 3/150 2026-03-28 14:13 by 唐沐儿
[考研] 311求调剂 +4 冬十三 2026-03-24 4/200 2026-03-28 13:17 by 唐沐儿
[考研] 调剂310 +4 温柔的晚安 2026-03-25 5/250 2026-03-28 13:15 by 唐沐儿
[考研] 321求调剂 +6 材料cailiao 2026-03-21 6/300 2026-03-28 13:14 by 唐沐儿
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +8 邱gl 2026-03-27 8/400 2026-03-28 12:42 by 唐沐儿
[考研] 321求调剂 +6 璞玉~~ 2026-03-25 6/300 2026-03-28 11:09 by WWM123
[考研] 339求调剂 +6 烤麦芽 2026-03-27 8/400 2026-03-28 10:40 by 烤麦芽
[考研] 266分求材料化工冶金矿业等专业的调剂 +4 哇呼哼呼哼 2026-03-26 4/200 2026-03-27 17:02 by zhyzzh
[考研] 一志愿211,335分,0856,求调剂院校和导师 +4 倾____萧 2026-03-27 5/250 2026-03-27 11:52 by zhshch
[考研] 336材料求调剂 +7 陈滢莹 2026-03-26 9/450 2026-03-27 00:20 by wxiongid
[考研] 321求调剂 +6 Ymlll 2026-03-24 6/300 2026-03-26 20:50 by 不吃魚的貓
[考研] 325求调剂 +3 Aoyijiang 2026-03-23 3/150 2026-03-26 20:46 by 不吃魚的貓
[考研] 中国科学院深圳先进技术研究院-光纤传感课题组招生-中国科学院大学、深圳理工大学联培 +5 YangTyu1 2026-03-26 5/250 2026-03-26 18:27 by 猫咪猫咪呀
[考研] 085602 289分求调剂 +8 WWW西西弗斯 2026-03-24 8/400 2026-03-26 16:33 by 不吃魚的貓
[考研] 296求调剂 +4 汪!?! 2026-03-25 7/350 2026-03-25 16:41 by 汪!?!
[考研] 0854人工智能方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-24 4/200 2026-03-25 13:29 by 2177681040
[考研] 上海电力大学材料防护与新材料重点实验室招收调剂研究生(材料、化学、电化学,环境) +4 我爱学电池 2026-03-23 4/200 2026-03-25 00:59 by 1027_324
[考研] 材料/农业专业,07/08开头均可,过线就行 +3 呵唔哦豁 2026-03-23 4/200 2026-03-23 22:30 by 汪!?!
[考研] 308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-21 3/150 2026-03-22 16:54 by i_cooler
信息提示
请填处理意见