24小时热门版块排行榜    

查看: 1619  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

草哥cium

新虫 (正式写手)

[求助] 就问大神们,原核表达在上清里,然后要咋验证生物活性呀 已有2人参与

大神们我有一个问题,我总感觉自己氨基酸序列有突变,因为当初用的tap酶扩增的549bp片段用来做表达,不过也表达出来了,还在上清。所以想问问大神们,是不是一般要是氨基酸序列不太对是不会表达或者表达在上清的哇,一般都是咋验证蛋白质是不是有生物活性呀。。

@hc-material 发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

草哥cium

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 863828916 at 2018-05-30 20:53:20
突没突变直接测个序不就知道了啊?

ncbi..上没我这个序列。。第一个做的 没办法比对哇

发自小木虫Android客户端
3楼2018-05-30 21:29:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

863828916

金虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
突没突变直接测个序不就知道了啊?
2楼2018-05-30 20:53:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

863828916

金虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 草哥cium at 2018-05-30 21:29:24
ncbi..上没我这个序列。。第一个做的 没办法比对哇
...

蛋白序列也不知道吗?实验室没有高保真酶?
氨基酸突变的话有可能会导致蛋白不再上清,也有可能导致蛋白失活,但是这个不是绝对的。好多氨基酸突变了蛋白仍然表达,仍然有活性。so你直接把表达的蛋白用亲和柱提取出来直接测活性吧,毕竟活性好的话还管他图没突变

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2018-05-30 21:38:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

草哥cium

新虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by 863828916 at 2018-05-30 21:38:33
蛋白序列也不知道吗?实验室没有高保真酶?
氨基酸突变的话有可能会导致蛋白不再上清,也有可能导致蛋白失活,但是这个不是绝对的。好多氨基酸突变了蛋白仍然表达,仍然有活性。so你直接把表达的蛋白用亲和柱提取 ...

大神,是不是基本上 上清表达了就是蛋白质正确折叠了,就是有活性的哇。。。只是要是氨基酸突变了,可能活性改变了?  本人菜鸟

发自小木虫Android客户端
5楼2018-05-30 21:52:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] filecode +7 cratir 2026-08-14 11/550 2026-08-15 06:19 by 学员8dgXkO
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +11 Tide man 2026-08-10 12/600 2026-08-15 02:12 by home3163
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 4/200 2026-08-15 01:28 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 7lpolszZVXgi 2026-08-14 4/200 2026-08-15 01:08 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +5 Ldrop2023 2026-08-13 5/250 2026-08-14 18:48 by ssxclkj
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
信息提示
请填处理意见