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草哥cium

新虫 (正式写手)

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虫号: 7852302
注册: 2018-01-30
专业: 兽医寄生虫学

[求助] 就问大神们，原核表达在上清里，然后要咋验证生物活性呀已有2人参与

大神们我有一个问题，我总感觉自己氨基酸序列有突变，因为当初用的tap酶扩增的549bp片段用来做表达，不过也表达出来了，还在上清。所以想问问大神们，是不是一般要是氨基酸序列不太对是不会表达或者表达在上清的哇，一般都是咋验证蛋白质是不是有生物活性呀。。

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1楼 2018-05-30 20:23:43

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草哥cium

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引用回帖:

4楼: Originally posted by 863828916 at 2018-05-30 21:38:33
蛋白序列也不知道吗？实验室没有高保真酶？
氨基酸突变的话有可能会导致蛋白不再上清，也有可能导致蛋白失活，但是这个不是绝对的。好多氨基酸突变了蛋白仍然表达，仍然有活性。so你直接把表达的蛋白用亲和柱提取 ...

大神，是不是基本上上清表达了就是蛋白质正确折叠了，就是有活性的哇。。。只是要是氨基酸突变了，可能活性改变了? 本人菜鸟