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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 求小分子量蛋白做western blot的方法和经验～
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姜片123

新虫 (正式写手)

[求助] 求小分子量蛋白做western blot的方法和经验～

目标蛋白5-10KD，知道肯定有表达，但是做了western检测不到，感觉是方法不合适，比如电压，时间等没掌握好，希望做过的虫友给一些建议，谢谢～

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1楼 2018-05-14 11:41:01
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美亿美生物

捐助贵宾 (职业作家)

技术服务-实验代做
这个，还是要多跑几次呀

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4楼2018-05-14 15:02:51
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普通回帖

star013

新虫 (知名作家)
西门吹雪170: 屏蔽内容, 禁止发布商业性回帖 2018-05-15 07:53:12
本帖内容被屏蔽
2楼2018-05-14 12:12:15
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Jack1508

新虫 (初入文坛)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-05-15 07:52:35
主要还是膜的问题，您看以查一下跑小蛋白时胶的类型。。其他的方法不变。可能关键在于您的胶有问题
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3楼2018-05-14 13:20:58
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冰之雪域

新虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-05-15 07:52:51
做小分子的蛋白，需要用浓度比较高的胶，比如15%，或是连续梯度的的比如4-20%的胶。转膜时，膜的孔径用0.22的，因小分子容易转穿。

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5楼2018-05-14 20:27:17
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姜片123

新虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Jack1508 at 2018-05-14 13:20:58
主要还是膜的问题，您看以查一下跑小蛋白时胶的类型。。其他的方法不变。可能关键在于您的胶有问题

用的就是tris胶，浓度是15%

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6楼2018-05-14 23:29:33
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姜片123

新虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Jack1508 at 2018-05-14 13:20:58
主要还是膜的问题，您看以查一下跑小蛋白时胶的类型。。其他的方法不变。可能关键在于您的胶有问题

用的就是tris胶，浓度是15%

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7楼2018-05-14 23:29:49
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姜片123

新虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 美亿美生物 at 2018-05-14 15:02:51
这个，还是要多跑几次呀

已经跑了几次了

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8楼2018-05-14 23:34:01
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姜片123

新虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 冰之雪域 at 2018-05-14 20:27:17
做小分子的蛋白，需要用浓度比较高的胶，比如15%，或是连续梯度的的比如4-20%的胶。转膜时，膜的孔径用0.22的，因小分子容易转穿。

好，会注意下，谢谢

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9楼2018-05-14 23:56:35
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姜片123

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by star013 at 2018-05-14 12:12:15
我们可以做wb技术服务哈

可以的话，可以交流下哈～

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10楼2018-05-14 23:57:11
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