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求小分子量蛋白做western blot的方法和经验~
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姜片123
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专业: 生物大分子结构与功能
[
求助
]
求小分子量蛋白做western blot的方法和经验~
目标蛋白5-10KD,知道肯定有表达,但是做了western检测不到,感觉是方法不合适,比如电压,时间等没掌握好,希望做过的虫友给一些建议,谢谢~
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2018-05-14 11:41:01
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Jack1508
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流
2018-05-15 07:52:35
主要还是膜的问题,您看以查一下跑小蛋白时胶的类型。。其他的方法不变。可能关键在于您的胶有问题
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3楼
2018-05-14 13:20:58
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专业: 环境微生物学
这个,还是要多跑几次呀
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2018-05-14 15:02:51
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流
2018-05-15 07:52:51
做小分子的蛋白,需要用浓度比较高的胶,比如15%,或是连续梯度的的比如4-20%的胶。转膜时,膜的孔径用0.22的,因小分子容易转穿。
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5楼
2018-05-14 20:27:17
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