24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1138  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

拂柳飞絮

新虫 (小有名气)

[交流] 为什么有酶活,但纯化不出蛋白?

遇到一个很奇怪的事,感觉蛋白像不表达,但破碎纯化后能测出有酶活,用的是DNS法测的酶活,酶活明显受温度、时间、PH等影响,但过ni柱纯化跑胶却没有条带,另外用不浓度诱导剂也看不出梯度差。请问一下,我这个蛋白表达了吗?为什么会出现这现象??

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hc-material

专家顾问 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
表达与很多因素有关,不只是IPTG的量,还有温度,时间,启动子等有关,看你描述的估计没表达

发自小木虫IOS客户端
5楼2018-05-11 13:08:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

拂柳飞絮

新虫 (小有名气)

2楼2018-05-10 09:26:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hc-material

专家顾问 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
破碎后先跟诱导前的样品对比看有没有表达,若表达了,看表达量,在去分析没挂镍柱的原因,没挂镍柱有很多原因,比如柱子没平衡好,HIS标签在蛋白结构里面,未暴露出来等等。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2018-05-10 11:23:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

拂柳飞絮

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by hc-material at 2018-05-10 11:23:58
破碎后先跟诱导前的样品对比看有没有表达,若表达了,看表达量,在去分析没挂镍柱的原因,没挂镍柱有很多原因,比如柱子没平衡好,HIS标签在蛋白结构里面,未暴露出来等等。

谢谢,用不同浓度的IPTG看不出变化,会不会LB培养基里面含一些其他成分会诱导表达?直接煮的时候,有一条条带大小和我的目的条带差不多,可以就是不挂柱,也许是我缓冲液ph不对?我的缓冲液是7.0,我打算换7.4试试。

发自小木虫Android客户端
4楼2018-05-11 09:18:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 327求调剂 +4 小卡不卡. 2026-03-29 4/200 2026-03-30 06:15 by wxiongid
[考研] 求调剂 +4 QiMing7 2026-03-25 5/250 2026-03-29 21:10 by 唐沐儿
[考研] 08工科求调剂286 +3 tgs_001 2026-03-28 3/150 2026-03-29 18:29 by 1018329917
[考研] 298求调剂 +4 种圣赐 2026-03-28 4/200 2026-03-29 08:42 by q1092522407
[考研] 332求调剂 +4 @MZB382400 2026-03-28 4/200 2026-03-28 21:02 by 唐沐儿
[考研] 283求调剂 +3 A child 2026-03-28 3/150 2026-03-28 15:41 by ms629
[考研] 张芳铭-中国农业大学-环境工程专硕-298 +4 手机用户 2026-03-26 4/200 2026-03-28 07:17 by mmm just
[考研] 352分 化工与材料 +5 海纳百川Ly 2026-03-27 5/250 2026-03-28 03:39 by fmesaito
[考研] 070300化学求调剂 +4 起个名咋这么难 2026-03-27 4/200 2026-03-27 21:39 by 83503孙老师
[考博] 26申博 +3 加油冲啊! 2026-03-26 3/150 2026-03-27 15:38 by cls512
[考研] 279 分 求调剂 +4 睡个好觉_16 2026-03-24 4/200 2026-03-27 15:05 by 醉在风里
[考研] 复试调剂,一志愿南农083200食品科学与工程 +5 XQTJZ 2026-03-26 5/250 2026-03-27 14:49 by 狂炫麦当当
[考研] 考研化学308分求调剂 +10 你好明天你好 2026-03-23 12/600 2026-03-27 14:43 by shangxh
[考研] 316求调剂 +5 Pigcasso 2026-03-24 5/250 2026-03-27 12:10 by zhshch
[考研] 一志愿吉大071010,316分求调剂 +3 xgbiknn 2026-03-27 3/150 2026-03-27 10:36 by guoweigw
[考研] 一志愿陕师大生物学071000,298分,求调剂 +5 SYA! 2026-03-23 5/250 2026-03-27 09:29 by 不吃魚的貓
[考研] 342求调剂 +3 加油a李zs 2026-03-26 3/150 2026-03-27 00:29 by wxiongid
[考研] 机械学硕310分,数一英一,一志愿211本科双非找调剂信息 +3 @357 2026-03-25 3/150 2026-03-26 16:34 by by.MENG
[考研] 300分,材料,求调剂,英一数二 +5 超赞的 2026-03-24 5/250 2026-03-24 21:07 by 星空星月
[考研] 一志愿山东大学药学学硕求调剂 +3 开开心心没烦恼 2026-03-23 4/200 2026-03-24 00:06 by 开开心心没烦恼
信息提示
请填处理意见