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为什么有酶活,但纯化不出蛋白?
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遇到一个很奇怪的事,感觉蛋白像不表达,但破碎纯化后能测出有酶活,用的是DNS法测的酶活,酶活明显受温度、时间、PH等影响,但过ni柱纯化跑胶却没有条带,另外用不浓度诱导剂也看不出梯度差。请问一下,我这个蛋白表达了吗?为什么会出现这现象?? 发自小木虫Android客户端 |
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hc-material
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3楼2018-05-10 11:23:58
2楼2018-05-10 09:26:53
送红花一朵 |
谢谢,用不同浓度的IPTG看不出变化,会不会LB培养基里面含一些其他成分会诱导表达?直接煮的时候,有一条条带大小和我的目的条带差不多,可以就是不挂柱,也许是我缓冲液ph不对?我的缓冲液是7.0,我打算换7.4试试。 发自小木虫Android客户端 |
4楼2018-05-11 09:18:53
hc-material
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5楼2018-05-11 13:08:20













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