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为什么有酶活，但纯化不出蛋白？
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遇到一个很奇怪的事，感觉蛋白像不表达，但破碎纯化后能测出有酶活，用的是DNS法测的酶活，酶活明显受温度、时间、PH等影响，但过ni柱纯化跑胶却没有条带，另外用不浓度诱导剂也看不出梯度差。请问一下，我这个蛋白表达了吗？为什么会出现这现象？？ 发自小木虫Android客户端 |
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萌生出自己或许不适合搞科研的想法，现在跑or等等看？
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2楼2018-05-10 09:26:53
hc-material
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3楼2018-05-10 11:23:58
送红花一朵 |
谢谢，用不同浓度的IPTG看不出变化，会不会LB培养基里面含一些其他成分会诱导表达？直接煮的时候，有一条条带大小和我的目的条带差不多，可以就是不挂柱，也许是我缓冲液ph不对？我的缓冲液是7.0，我打算换7.4试试。 发自小木虫Android客户端 |
4楼2018-05-11 09:18:53
hc-material
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5楼2018-05-11 13:08:20
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9楼2018-05-15 23:26:18