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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物信息 » 求助：（蛋白纯化的分析）
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可爱宝宝

新虫 (正式写手)
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求助：（蛋白纯化的分析）
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最近拿到粗酶液后在做蛋白纯化，利用的是蛋白的his标签能与ni柱结合，结果发现无论多长时间我的蛋白都挂不上去。想请教大神们，有没有什么方法或软件可以预测一下我蛋白的his标签是不是被包裹在蛋白内部了？非常感谢╰(*?︶`*)╯

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1楼 2018-04-28 12:17:45
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yubeihong

铁杆木虫 (职业作家)
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
变性后试试能不能挂上。可以用purimag Ni磁珠

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12楼2018-04-28 12:36:31
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可爱宝宝

新虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by yubeihong at 2018-04-28 12:36:31
变性后试试能不能挂上。可以用purimag Ni磁珠

变性后挂上就没意义了，我后续要做功能

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13楼2018-04-28 14:04:25
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yubeihong

铁杆木虫 (职业作家)
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13楼: Originally posted by 可爱宝宝 at 2018-04-28 14:04:25
变性后挂上就没意义了，我后续要做功能
...

变性后能挂上说明组氨酸标签没露出来，变性后也挂不上说明根本就没表达组氨酸标签，质粒设计有问题

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14楼2018-04-28 17:38:14
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可爱宝宝

新虫 (正式写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by yubeihong at 2018-04-28 17:38:14
变性后能挂上说明组氨酸标签没露出来，变性后也挂不上说明根本就没表达组氨酸标签，质粒设计有问题
...

嗯呐，你们通常是通过加点巯基乙醇，然后加热五分钟变性嘛？还是有其它方法？

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15楼2018-04-29 08:46:08
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小树懒很好

新虫 (小有名气)
★
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请问楼主这个问题解决了吗，我也有相同的问题

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16楼2021-04-18 23:27:14
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hdchina20102楼
2018-04-28 12:18   回复  
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pandongzi3楼
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limi10094楼
2018-04-28 12:20   回复  
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紫色梦想19925楼
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qudingfeng6楼
2018-04-28 12:20   回复  
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烟台硅胶板7楼
2018-04-28 12:24   回复  
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zbg2190018楼
2018-04-28 12:30   回复  
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gao199207079楼
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yubeihong10楼
2018-04-28 12:34   回复  
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杜思熠11楼
2018-04-28 12:35   回复  
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