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求助:(蛋白纯化的分析)
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可爱宝宝
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最近拿到粗酶液后在做蛋白纯化,利用的是蛋白的his标签能与ni柱结合,结果发现无论多长时间我的蛋白都挂不上去。想请教大神们,有没有什么方法或软件可以预测一下我蛋白的his标签是不是被包裹在蛋白内部了?非常感谢╰(*?︶`*)╯
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1楼
2018-04-28 12:17:45
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可爱宝宝
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Originally posted by
yubeihong
at 2018-04-28 17:38:14
变性后能挂上说明组氨酸标签没露出来,变性后也挂不上说明根本就没表达组氨酸标签,质粒设计有问题
...
嗯呐,你们通常是通过加点巯基乙醇,然后加热五分钟变性嘛?还是有其它方法?
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15楼
2018-04-29 08:46:08
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yubeihong
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变性后试试能不能挂上。可以用purimag Ni磁珠
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12楼
2018-04-28 12:36:31
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12楼
:
Originally posted by
yubeihong
at 2018-04-28 12:36:31
变性后试试能不能挂上。可以用purimag Ni磁珠
变性后挂上就没意义了,我后续要做功能
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13楼
2018-04-28 14:04:25
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13楼
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可爱宝宝
at 2018-04-28 14:04:25
变性后挂上就没意义了,我后续要做功能
...
变性后能挂上说明组氨酸标签没露出来,变性后也挂不上说明根本就没表达组氨酸标签,质粒设计有问题
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14楼
2018-04-28 17:38:14
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yubeihong
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2018-04-28 12:34
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hdchina2010
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qudingfeng
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pandongzi
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limi1009
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gao19920707
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紫色梦想1992
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杜思熠
11楼
2018-04-28 12:35
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烟台硅胶板
7楼
2018-04-28 12:24
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