| 查看: 3410 | 回复: 13 | |||
| 【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 只爱飞雪 的 39 个金币 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
只爱飞雪捐助贵宾 (著名写手)
|
[交流]
酵母破碎方案拿去
|
||
|
多年的生化、遗传学及分子分析研究所得的大量研究结果，使酵母成为生物制药研究者首选的模式生物系统和工具。因此，酵母成为普遍的基因表达研究和重组蛋白的常见载体。尽管研究用的酵母种属有多种，包括毕赤酵母属、汉逊酵母属和德巴利氏酵母属，但最常用的还是酵母菌属。 使用传统的酶分解法通常很难从细胞中提取完整的酵母mRNA和细胞内蛋白。裂解酶通常是粗制备，包含的RNA酶和蛋白酶不仅会破坏细胞壁，还会破坏目标分子。而且，酶裂解出原生质体通常需要加入去垢剂，而去垢剂会造成多种蛋白质失活。因此，机械裂解或破坏酵母细胞通常需要释放一些小分子。 1、破碎前的准备： 0.1g菌体（本实验以0.1g菌体为例）；直径10号钢珠；研磨机；50ML研磨罐。 2、研磨。 0.1g菌体加入30ML PBS溶液，混匀后用移液器均匀滴入液氮中，收集液氮冻住的小球，将小球放入预冷过的研磨罐中，调整频率为65Hz，震荡时间20S。取下研磨罐再次放入液氮预冷15-20S取出来再次上机研磨。重复3次。 具体实验具体分析    发自小木虫IOS客户端 [ Last edited by 小冀- on 2018-1-23 at 09:13 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
连续3年国社科青年本子都没中，今年最后一次青年了，写本子完全浪费时间
已经有15人回复
-
博三一直没文章怎么办
已经有15人回复
-
蹲一个男朋友
已经有24人回复
-
又见奇葩学生，可咋办
已经有7人回复
-
河北省基金
已经有17人回复
-
今天才知道硕士考进大专比博士进本科工资高得多
已经有9人回复
-
博士去高校就是为了有寒暑假吗？
已经有20人回复
-
一个审稿人已返回，也没邀请审稿人，也没人审稿中，编辑要闹啥？
已经有12人回复
-
有博导缺学生吗，我可以当牛做马
已经有56人回复
-
申请基金代表性成果
已经有10人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
只爱飞雪: 金币+8, 感谢分享 2018-02-08 14:34:21
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
只爱飞雪: 金币+8, 感谢分享 2018-02-08 14:34:21
|
买sigma的消解酶，30分钟，酵母菌体裂解的干干静静 发自小木虫Android客户端 |
13楼2018-01-25 19:23:13
3