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着急!!!!请问一下胶回收之后的产物想用Taq酶P加A 之后T链接!!!就是P不出来!!
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MAAAYUUU
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着急!!!!请问一下胶回收之后的产物想用Taq酶P加A 之后T链接!!!就是P不出来!!
着急!!!!请问一下胶回收之后的产物(还挺亮的)
之后想用Taq酶P加A 之后T链接!!!就是P不出来!!用的是EXtaq酶
请问有什么解决办法吗?????
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tableman
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cosmos796
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1.可以换全式金平末端的载体,我们一直都是这样的 2.加A尾PCR是否合适,PCR产物我以前是直接连载体,没有再回收也有做出来,不过最好用平末端载体简单
问题连条带也没有啊啊啊啊啊
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7楼
2017-12-24 09:31:01
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cosmos796
at 2017-12-24 09:55:23
P不出来的问题就多了,模板引物扩增条件,如果能有了正对照,就是已经做出来的,换酶或者模板试下
...
用高保真I5能P出来 但我现在是想加A连PMD-19 用Taq酶就P不出来
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9楼
2017-12-24 10:02:43
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cosmos796
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如果是这样,建议退火温度进行touch down or touch up,试一下这个
好的!感谢!我试试!
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11楼
2017-12-24 12:17:07
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要p吗,我买的pGEMT载体,说明书说只要加taq酶和buffer,70摄氏度,30min就可以用于t连接了
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12楼
2017-12-24 17:42:20
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ken19860823
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你是高保真酶先做的pcr吧,不用回收。pcr结束后加0.5ulextaq或者其他taq酶都行,然后再回收。
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13楼
2017-12-25 07:51:09
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didongwei
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一般普通taq酶都有加A功能,不用额外再跑Pcr
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14楼
2017-12-25 08:00:27
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rkgzd18
3楼
2017-12-23 22:01
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qgqmptj16
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2017-12-23 22:19
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nono2009
5楼
2017-12-23 22:32
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