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PCR凝胶电泳图分析(小鼠组织DNA)
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木叶林森
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PCR凝胶电泳图分析(小鼠组织DNA)
如图,提取小鼠DNA后PCR凝胶电泳,结果出现两条带,上面的条带是目的DNA,但下面的那些又粗又亮的条带是什么啊?还有这样的PCR产物能用于基因测序吗?
DNA.jpg
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2017-11-22 11:04:35
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Rachel zou
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木叶林森(金币+1): 谢谢参与
下面的是引物二聚体,你可以多扩增几管,把所有产物点样到一个孔里。然后跑电泳,再做胶回收,这样,你得到的就是你的目的基因了。
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15楼
2017-11-22 20:29:42
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木叶林森
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虫号: 5867251
这是PCR后的,不是直接用DNA跑
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3楼
2017-11-22 11:17:05
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bbass533
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木叶林森(金币+1): 谢谢参与
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7楼
2017-11-22 11:37:40
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dadadalin
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木叶林森(金币+1): 谢谢参与
小鼠DNA这么小?降解??
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2楼
2017-11-22 11:13:21
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木叶林森
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2楼
:
Originally posted by
dadadalin
at 2017-11-22 11:13:21
小鼠DNA这么小?降解??
这是PCR产物电泳,不是直接拿DNA电泳
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4楼
2017-11-22 11:18:08
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紫荆ysh
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木叶林森(金币+1): 谢谢参与
二聚体吧
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16楼
2017-12-16 23:11:18
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ZYY张媛媛
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木叶林森(金币+1): 谢谢参与
这个应该是引物二聚体,你的引物用的什么浓度的啊?
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17楼
2017-12-18 21:35:02
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One__Piece
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木叶林森(金币+1): 谢谢参与
你的引物长短应该是已知的啊,对比marker看下边带对应的bp长度应该可以知道它是不是引物二聚体吧,这是你提过DNA后PCR出来的结果,也就是不是小鼠基因组DNA了,那引物肯定也是根据目的条带设计的了吧,这样的话是不是可以考虑下边的带也是这个引物与其他位点结合扩出来的带。
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18楼
2017-12-19 08:54:16
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keyangbin
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木叶林森(金币+1): 谢谢参与
这些亮及小的带为非特异性扩增的带和引物二聚体。可能模板量过大了,设计的引物也不太好,可以增加退火温度再试试。当然测序是可以的,但风险比较大,建议二次扩增后纯化再送测
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19楼
2017-12-19 22:21:00
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勿忘初心球球
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木叶林森(金币+1): 谢谢参与
可能是引物二聚体,提高退火温度或降低镁离子浓度
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20楼
2018-01-04 23:39:25
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shenqi955
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22楼
2018-01-14 19:33:01
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进击的兔
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木叶林森(金币+1): 谢谢参与
底下的是引物二聚体,而且你目的条带不清晰,可能是引物设计不合理。你可以试试跑个温度梯度,然后把体系里引物的量降低。
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23楼
2018-01-14 21:34:41
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赵英0709
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★
木叶林森(金币+1): 谢谢参与
引物二聚体
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24楼
2018-03-14 18:08:05
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renweihe
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木叶林森(金币+1): 谢谢参与
试着纯化一下,然后再去测序
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25楼
2018-04-09 17:39:53
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keyangbin
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虫号: 7643895
建议把上面的目的条带回收纯化后再用相同的引物再次扩增后再送测,这样可以更加精确得到你所要的条带,同时测序更有保障!
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26楼
2018-04-09 18:27:10
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琳琳blue
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★
木叶林森(金币+1): 谢谢参与
你提高退火温度,降低引物量,减少循环次数。重新跑一次试试
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27楼
2018-11-18 22:15:54
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请回答2019
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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28楼
2019-06-20 13:27:15
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hongyingwu
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2017-11-22 11:29
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dongmings
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youngen
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zhaoyan1978
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syhorchid
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绯红deつ憶
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