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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 如何进行双酶切胶回收，质粒中的标记基因是哪个？
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entiaopi

新虫 (初入文坛)

[求助] 如何进行双酶切胶回收，质粒中的标记基因是哪个？

我现在做的是把一个基因转移到，t载体上面，再转到p载体上。本人没有做过双酶切，不知道怎么如何将提取的含有目的基因的t载体酶切，然后装到p载体上面。
然后二者连接后需要纯化还是可以直接导入感受态细胞
最后问下这个载体的标记基因是哪个？可以用蓝白斑筛选吗？

如何进行双酶切胶回收，质粒中的标记基因是哪个？


@wizardfan 发自小木虫Android客户端
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1楼 2017-11-06 23:06:00
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entiaopi

新虫 (初入文坛)
可能语无伦次了，因为之前没做过这类实验，不好下手。搞失败会被导师批评

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2楼2017-11-06 23:07:37
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匿名

用户注销 (著名写手)
本帖仅楼主可见
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3楼2017-11-06 23:11:12
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entiaopi

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by kentyu at 2017-11-06 23:11:12
kan抗性呀，你看看质粒的说明书，商家一般都会有相应的介绍

请问一下，那如何知道转化进入的不是空质粒呢？

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4楼2017-11-06 23:25:57
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xtcao668

至尊木虫 (著名写手)
卡纳抗性原核筛选，色氨酸在酵母中筛选

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生活的理想就是理想的生活
5楼2017-11-06 23:46:49
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buthey

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by entiaopi at 2017-11-06 23:25:57
请问一下，那如何知道转化进入的不是空质粒呢？
...

菌液PCR

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6楼2017-11-08 13:16:52
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